丁香园新冠状

Ⅰ micro RNA二级结构

RNA干扰及其应用进展
孙德惠1,2,才学鹏1*,常惠芸1 ,独军政1
(1.中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室,甘肃兰州 730046;2.甘肃农业大学动物医学院,甘肃兰州 730070)

摘 要:RNA 干扰(RNA interference,RNAi)是一种由双链RNA介导的基因沉默现象.RNAi主要发生在核外,RNAi具有操作简便快速等特点.RNAi现象自发现至今已逾10年,在此期间,已将研究重点由机理研究转向应用研究.文章以RNAi的应用为重点,从RNAi的起源,可能的作用机制,作用特点,研究方法,应用前景及展望等方面进行了综述.
关键词:RNA干扰;双链RNA;基因沉默
RNAi是Napoli C D等[1]在试图向紫色矮牵牛花转导色素合成基因,用以增加其花色时发现的.结果出乎预料,转基因的植株不仅没有新基因的表达,反而自身的色素合成也减弱了,一些转基因的花出现了全白色或部分白色.他们把这种导入的基因未表达和植物本身合成色素基因的失活现象命名为共抑制(cosuppression).之后,Ramano等在向粗糙孢菌�(Neurospora crassa)�中导入合成胡萝卜素的基因时造成失活,他们称为基因静止(quelling).Guo S等[2]发现正义RNA与反义RNA有相同水平的抑制效应,但未能就此现象给出合理的解释.Fire A等[3]在研究反义核苷酸时发现在线虫体内,双链RNA( double stranded RNA,dsRNA)能有效地抑制有互补序列的内源性基因,且抑制效果优于单链反义RNA.至此,正式提出了双链RNA诱导的RNAi的概念,开启了RNAi研究的序幕.
1 RNAi可能的作用机制及特点
1.1 RNAi的作用机制
虽然RNAi作用的确切机制尚不清楚,但目前普遍认可是Bass假说.具体概括为三个阶段.
(1)起始阶段.在细胞内,双链RNA(dsRNA)由核酸酶Ⅲ(RNaseⅢ) Dicer 在ATP的参与下被处理为21个～23个碱基的小RNA,即小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA).siRNA是由19个～21个碱基配对形成的双链,并在其3′末端有两个游离未配对的核苷酸.研究发现, siRNA 是RNAi 作用发生的重要中间分子,序列与所作用的靶mRNA 的序列具有高度同源性;双链的两端各有2个～3个突出的非配对的3′碱基;两条单链末端为5′端磷酸和3′端羟基.这些是细胞赖以区分真正的siRNA和其他双链RNA的结构基础. 研究表明,平末端的siRNA 或失去了5′磷酸基团的siRNA 不具有RNAi 的功能[4]
(2)引发阶段.siRNA与Argonaute蛋白家族及其他未知因素结合,形成siRNA-核蛋白复合物(siRNA-ribonucleoprotein complex,siRNP).siRNP在ATP及其他未知因素参与下,使双链siRNA解旋形成RNA诱导的沉默复合物(RNA incing silencing Complex ,RISC).RISC可能以完全单链或两条链解旋但不完全分离的形式存在,继而RISC在dsRNA的介导作用下与互补mRNA结合,并将其降解.mRNA被降解在转录后水平,抑制基因表达,因而又称之为转录后基因沉默( posttranscriptional gene silencing,PTGS)
(3)循环放大阶段.在siRNA诱导的RNAi过程中,可能还存在siRNA 的循环放大过程,以维持它的RNA诱导功能.此过程推测是以siRNA为引物,互补mRNA 为模板,在RNA依赖性RNA合成酶(RNA-dependent RNA Polymerase,RdRP) 的作用下,合成新的双链RNA,再由Dicer作用,产生新的siRNA,完成siRNA 的放大过程,开始新的RNAi循环[5].
关于对RNAi机制中重要酶的作用研究,Zamore P D等[6]发现,21 nt RNA指导mRNA的降解; Scharf W D等[7]发现ATP依赖的RNA解旋酶为Mut6;Grishok A等[8]发现Let-7和lin-4为内源性的RNAi基因(stRNA);Dalmay T等[9]提出RNA依赖的RNA多聚酶就是SDE-1; Bernstein E等[10]证实RNaseш样的核酸酶为Dicer; Elbashir S M等[11]应用外源性21 nt-siRNA能够抑制同源mRNA的表达;Novina C D等[12]证实无论是针对病毒感染细胞所需的CD4受体,还是针对病毒基因组的gag区域,siRNA都可以有效地使病毒与细胞的基因沉默,抑制HIV的感染与复制.
1.2 RNAi的作用特点
(1)"共抑制"性.RNAi是双链RNA介导的转录后基因沉默机制,它的启动子相当活跃,外源基因可以转录,但不能正常积累mRNA;RNAi作用不仅使外源基因在转录后水平上失活,同时诱导与其同源的内源基因沉默.
(2)高效性.试验证明双链RNA干扰mRNA 翻译的效率比单纯反义或正义RNA 的抑制效率提高了几个数量级;RNAi可在低于反义核酸几个数量级的浓度下,使靶基因表达降到很低水平甚至完全"剔除",而产生缺失突变体表型.它比基因敲除技术更为便捷,科学家称RNAi技术为靶基因或靶蛋白的"剔降"(knockdown).
(3)高特异性.由dsRNA降解成的小干扰RNA,除其正义链3′端的两个碱基在序列识别中不起主要作用外,其余碱基在序列识别中都是必需的,单个碱基的改变即可使RNAi失效,RNAi能特异性降解mRNA,针对同源基因共有序列的RNAi则可使同源基因全部失活.
(4)高穿透性.RNAi具有很强的穿透能力,能在不同的细胞间长距离传递和维持,如在含有双链RNA的溶液中,喂食表达双链RNA的细菌等,能向秀丽隐杆线虫导入双链RNA.
(5)"遗传性".已在线虫中观察到RNAi效应通过生殖系传递到后代,说明RNAi具有一定的可遗传性.
(6)高稳定性.细胞中可能存在天然的稳定siRNA的机制.此机制可能是siRNA与某种保护性蛋白结合,从而使其具有相对的稳定性,这些双链RNA 不像反义核酸那样需要多种化学修饰来提高其半衰期.
(7)双干扰系统.哺乳动物中存在有非特异性干扰和特异性干扰两条独立的途径. 非特异性干扰反应是由大于30个碱基对的双链RNA介导,导致整个细胞中非特异性蛋白合成抑制,RNA降解;特异性反应由21 bp～25 bp的小干扰RNA介导,可逃避非特异性干扰系统的"监控",只降解与其序列相应的单个基因的mRNA[11].
2 研究方法
在研究过程中,科研人员逐渐摸索总结出了成套的研究方法.目前,展开RNAi操作主要有两种方法.一种为直接将靶向特定基因的大约21个碱基长短siRNA,或45个~50个碱基的发夹结构RNA(small hairpin RNA,shRNA)转染到细胞,shRNA在细胞中会自动被加工成siRNA,从而引发基因沉默或表达抑制.另一种为构建特定的siRNA表达载体,通过质粒在体内表达siRNA而引发基因沉默.此法的优点是排除了RNA酶干扰,延长siRNA半衰期.更重要的是,该法可以进行稳定表达细胞株的筛选,且随着质粒复制扩散到整个机体,基因抑制效果可传代.试验表明,可被化学合成或体外合成的siRNA抑制的基因同样可被表达相同序列的载体表达出的siRNA所抑制.
3 RNAi的应用
3.1 基因功能研究
在神经生物学研究中,科学家们通过siRNA表达质粒对中脑腹侧神经细胞中的多巴胺能相关基因进行了有效抑制,还通过病毒介导的RNAi建立了此类成年小鼠模型,不仅为建立神经系统的功能缺失模型找到了一些有价值的表型标记,对神经系统的基因治疗也有一定借鉴意义;在癌症研究中,通过shRNA表达载体成功抑制成年大鼠脑癌基因,同时对RNAi的远程(穿过血脑屏障)基因沉默方法进行了非常有益的探索;利用细胞凋亡途径,通过RNAi抑制凋亡基因Caspase-8能提高患急性肝功能衰竭小鼠的成活率,并发现Caspase 8 siRNA处理对特异性Fas激活剂(Jo2和AdFasL)和野生型腺病毒介导的急性肝功能衰竭都有效,表明这个动物模型能反应人类急性病毒肝炎多分子参与的机制,增强了siRNA用于急性肝炎病人治疗的希望.除了对某些关键基因的RNAi研究外,还在哺乳动物细胞中探索了siRNA在基因组水平上的筛选方法.他们建立了一个包含8 000多个基因的siRNA表达框文库阵列,通过它来高通量筛选NF-kB信号途径中已知的及Unique基因.由此可见,RNA干扰也正作为筛选成百甚至上千基因的工具,发挥着越来越大的作用[13].RNAi为系统地抑制RNA分子合成蛋白提供了快速而相对简便的途径.通过在一段时间内对一个基因RNA信号的抑制,研究者可以深入研究基因功能,进而描绘支配从细胞形态到信号系统的遗传网络.
3.2 基因治疗及药物筛选探索
由于RNAi是针对转录后阶段的基因沉默,相对于传统基因治疗对基因水平上的敲除,整个流程设计更简便,且作用迅速,效果明显,为基因治疗开辟了新的途径.其总体思路是通过加强关键基因的RNAi机制,控制疾病中出现异常的蛋白合成进程或外源致病核酸的复制及表达.尤其针对引起一些对人类健康严重危害的病毒,如2003年在全球多个国家和地区流行的SARS,病原体是单链核酸的新型冠状病毒,寻找药物靶点,设计核酸药物就更为方便.目前已经有很多公司在积极开发这方面的药物,如在SARS药物研究中一鸣惊人的美国俄勒冈州的AVI BioPharma生物制药公司等.国内也有很多研究机构及生物技术公司投入了这方面的工作.如上海生科院成立了SARS防治科研攻关小组,其中生化细胞所和药物所的一些课题组在从RNAi的角度努力.此外,北京大学,中南大学,北京动物所等大专院校和研究机构,以及北京金赛狮反义核酸技术开发有限公司等,也开展了RNAi药物的研究与开发.
基因治疗方面最引人注目的进展之一是对肝炎病毒的RNAi研究.Mccaffrey A P等通过表达shRNA的载体在细胞水平和转染HBV质粒后免疫活性缺失的小鼠肝脏中成功抑制了HBV复制.与对照相比,小鼠血清中测得的HBsAg下降了84.5%,免疫组化对HBcAg的分析结果下降率更超过99%.哈佛大学Lieberman研究小组通过注射针对Fas的siRNA,过度激活炎症反应,诱导小鼠肝细胞自身混乱.然后给测试小鼠注入 Fas hyperdrive的抗体,发现未进行siRNA处理的对照组小鼠在几天中死于急性肝功能衰竭,而82%的siRNA处理小鼠都存活下来,其中80%~90%的肝细胞结合了siRNA.并且,RNAi发挥功能达10 d,3周后才完全衰退.由于Fas很少在肝细胞外的其他细胞高水平表达,它对其他器官几乎没有副作用.此外,这个小组还和其他研究者积极开展针对HIV的RNAi测试,目前报道他们使用的针对CCR5蛋白的siRNA能阻止HIV进入免疫细胞约3周,在已经感染的细胞中也能阻止感染病毒的复制.
然而,尽管取得了不少研究成果,但要真正用于医疗还需时日.目前大多数还停留在小鼠测试阶段,siRNA的导入多采用静脉或腹腔注射,尾部注射,细胞移植等,如何对人进行有效的给药,既能确保药效在靶器官靶组织有效释放,还要具有高度安全性等问题都需进一步研究.人们期待着RNAi引领的新医学革命的到来.
在药物筛选领域,除了线虫这种低等动物的RNAi高通量药筛模式外,Lavery K S等对RNAi在药筛领域的应用前景进行了高度评价,RNAi技术将逐渐成为药物靶点筛选和鉴定的强大工具.他对如何在药筛的各个阶段应用RNAi做了具体描述及展望,并指出将这项技术与高通量筛选,体外生物检测和体内疾病模式相结合,将提供大量基因功能方面的有用信息,在药物开发过程的多个阶段促进靶点的有效筛选.
3.3 抗肿瘤治疗
多种癌基因可以作为靶点设计相对应siRNA[14].Brummelkamp T R等[15]用逆转录病毒载体将siRNA 导入肿瘤细胞中,特异性抑制了癌基因K2RAS (V12)的表达.对急性髓性白血病的研究已经取得了较好的结果.Scherr M等[16]以引起慢性髓性白血病和bcr2abl阳性急性成淋巴细胞白血病的bcr2abl癌基因为靶基因,设计了对应的siRNA,并获得了87% 的有效抑制率.Wilda M等[17]用siRNA抑制白血病BCR/ABL融合基因表达也取得了成功. 因此,基于RNAi 技术的抗肿瘤治疗药物开发潜力巨大.有报道称,一种全新生物工程药品"RNA干扰剂"(非干扰素)业已浮出水面,并有望在3年内上市.经过多年的探索,科学家终于发现,在癌细胞和病毒RNA的22对碱基中有1对碱基专门负责复制工作,只要能使这对碱基"休眠",癌细胞或病毒就会自动停止复制.这一重要发现为一种全新药物——RNA干扰剂奠定了基础.科学家们相信,艾滋病,乙型肝炎,恶性胶质瘤(恶性脑瘤)和胰腺癌等疾病有望成为RNA干扰剂的第一批受益者(2004年经FDA批准已开始RNA干扰剂的临床试验),艾滋病,中枢神经系统退行性病变疾病如多发性硬化症,阿尔茨海默病,帕金森病等将成为第二批受益者.
3.4 抗病毒治疗
由于RNAi 是机体中古老而天然的抗病毒机制,目前国外科技人员利用此特点,已设计出针对HIV gag,tat,rev,nef等基因的siRNA,针对丙型肝炎病毒非结构蛋白5B基因的siRNA,针对脊髓灰质炎病毒衣壳蛋白和多聚酶基因的siRNA,针对口蹄疫病毒3D片段siRNA等[18],均在试验中取得理想结果.陆续有关通过RNAi抑制其他病毒在细胞内复制的报道如呼吸道合胞病毒,人乳头瘤病毒,乙型肝炎病毒,丙型肝炎病毒[19]等,国内也已设计出针对口蹄疫病毒VP1基因的siRNA,针对丙型肝炎病毒5′保守区的siRNA,针对口蹄疫病毒IRES和L串联序列两侧的保守区的siRNA[20],针对SARS冠状病毒的6个siRNA,即RL001,R L002,RL003,RL004,RL005和RL006,均已取得理想结果.针对病原的siRNA已经进行到动物实验阶段[21],向病毒病的有效防治迈出了坚实的一步.由此可见,利用RNAi技术将使病毒病的有效治疗成为可能.
3.5 转基因研究
在动植物的转基因试验中, 经常发生基因沉默.因此, 对转基因沉默机制的探索可以为在转基因研究中避免基因沉默提供对策.在转基因植物研究中避免基因沉默可提高试验成功率,且节省时间,而在大型动物转基因研究中避免基因沉默可节约成本,提高产率.
3.6 干细胞研究
在干细胞研究方面,在dsRNA阻断大鼠骨髓源性神经干细胞 Hes5表达的试验中[22],观察外源性短dsRNA在转录后水平mRNA水平降低基因表达的效率,并对其影响因素进行了初步探讨.同时基于干细胞可能拥有自己的一套基因组,不同类型的干细胞又拥有各自所特有的基因,这些基因可能是决定干细胞特性的最关键的实质性因素.因此,RNAi技术在此领域应用空间广阔.
3.7 研究信号传导的新途径
Biotech认为,联合利用传统的缺失突变技术和RNAi技术可以很容易地确定复杂的信号传导途径中不同基因的上下游关系,Clemensy等应用RNAi研究了果蝇细胞系中胰岛素信息传导途径,取得了与已知胰岛素信息传导通路完全一致的结果.RNAi技术较传统的转染试验简单,快速,重复性好,克服了转染试验中重组蛋白特异性聚集和转染率不高的缺点,因此认为RNAi技术可能成为研究细胞信号传导通路的新途径.
3.8 常见病的治疗
Nature杂志报道了miRNA(Micro RNA)的应用上一个重要发现,成功采用miRNA调节了胰岛素的分泌,这为糖尿病的治疗带来新的希望,也将为糖尿病的新药研究带来新的曙光和思路.据Sicence杂志报道,显示应用RNAi技术可有效降低血管内胆固醇含量,对治疗心血管疾病有明显的作用.
4 展望
综上所述,RNAi技术在基因功能研究,抗肿瘤治疗,抗病毒治疗,基因应用研究,常见病的治疗等许多方面都是强有力的工具和手段.同时做为新兴的生物技术,还有广阔的研究和应用空间期待着科研人员的探索.例如,siRNA在病毒持续性感染过程中扮演怎样的角色 siRNA在冬眠动物体内的作用如何 RNAi在雀斑形成中起到怎样的作用 如上述问题得到解决,将进一步依据其机理及特点,有望应用于病毒持续性感染的鉴别诊断及治疗,利用siRNA在冬眠动物体内的作用进行星际航行,以解决能量供应及时间跃迁问题,RNAi应用于祛除雀斑等.
尽管在RNAi方面的研究已取得许多突破性进展,尤其是哺乳动物细胞中的研究的报道逐渐增多,但由于RNAi机制尚未完全阐明,仍有许多问题尚未得到彻底解答.例如,siRNA 在哺乳动物细胞中抑制mRNA表达是有效的, 但达不到果蝇细胞那样的高抑制率, 可能是因为生物进化水平越高,调控基因表达系统的复杂程度相应的越高,多种抑制机制间相互作用的频率也越高,抑制作用受到的影响因素也就越多.另外, 在哺乳动物中,RNAi能否成功地抑制基因表达以及抑制的程度还取决于细胞类型.对线虫来说,可以采用注射,浸泡或喂食的方法转入dsRNA,而对哺乳动物来说,寻找高效的方式来转入siRNA以及快速的方式来筛选siRNA仍在进一步探索中.RNAi在抗病毒感染中的应用令人鼓舞, 但要取得最终的成功还有很漫长的路要走.其中一个关键的原因是siRNA并不能对所有病毒RNA发生作用,有些病毒靶序列可能隐藏在二级结构下, 或者位于高度折叠的区域中, 而有些病毒序列可能与蛋白质形成紧密的复合物, 阻碍了与siRNA 的识别.因此,不仅要选合适的靶序列,而且需要反复试验.另一个重要的原因是病毒子代的突变率较高, 这使病毒可逃避siRNA 的识别.为了克服这个障碍,所选病毒RNA的靶序列必须是高度保守的, 或者设计数对siRNA同时作用[23].
总之,RNAi作为一种新发展起来的分子生物学技术,不可避免地会存在潜在的问题,这就要求研究者在利用该技术时要考虑到生物安全性等诸多问题,以使RNAi技术更好地为人类服务.
参考文献(略)

Ⅱ 浙江26岁麻醉规培医生连续加班后在宿舍猝死，怎么看

惊闻噩耗，6月28日晚，某医院26岁的规培医生陈德灵猝死。晚上夜班交接班没人，这才发现已经猝死在宿舍。

据网友提供的陈医生的朋友圈显示：“黑+白+黑，下班啦，还活着真好。”时间为2017年4月19日。然而时隔两月，他却没能像其他任何一个普通人那样继续活着！

陈医生的同事介绍，陈医生是规培医生，是一个很诚实的小伙，老实巴交，干活不偷懒。据悉，陈医生是2017年第五个猝死的年轻医生。

网友评论：

网友@灵绿野的爱花 ：“还活着真好”，就是人对自己的生命感觉很准或者说叫直觉，并且一旦有这样子的直觉要警惕警醒，就是人对于自己生命的感觉有预知能力，应及时调整预防猝死的发生。

Ⅲ 救命神器ECMO的前世今生

席卷中国的新型冠状病毒之战，让救命神器“ECMO”名声大噪。

1月22日，武汉大学中南医院用ECMO成功救治了一名“新型冠状病毒肺炎”重症患者，属全省首例。

1月23日，81套ECMO设备耗材从德国加急进口，星夜飞驰武汉金银潭医院的战场。

卫健委公布的第五版诊疗方案中，提出有条件的危重症患者应尽快使用ECMO。

国家卫健委第五版诊疗方案（2月8日印发）

ECMO，英文全称 Extracorporeal Membrane Oxygenation，中文名“体外膜肺氧合”，简称“人工膜肺”，最核心的部分是膜肺和血泵，分别起人工肺和人工心的作用。

我们第一次听说ECMO可能更早，那是18年2月的网络爆文《流感下的北京中年》。

作者的岳父因为小小的感冒，辗转多家医院，被确诊为不明病毒感染的肺炎，27天后阴阳两隔。

从这篇文章里，我们看到了不明病毒感染、血氧饱和度下降、大白肺、呼吸衰竭、ECMO，和新冠肺炎患者的关键词如此相似。

更普遍的，是每年冬春的甲乙流感导致的肺炎。他们和新冠肺炎都属于同一个类别：病毒性肺炎。

2018年1月底的广州，37岁的王女士（化名），受凉后咳嗽发烧，吃药无好转。2月5日，王女士因气促胸闷，前往暨南大学第一医院就诊。胸片显示双肺炎症，肺下部出现白色，当天住院治疗。首先是输液和吸氧。

为什么要吸氧？因为肺功能变的很弱，正常呼吸不能提供足够氧气。吸入纯氧，受损的肺才能给人体提供最低限度的氧气，维持大脑和重要器官的存活。

王女士的病情变化迅速，即使高流量吸氧，她的血氧指数最高才78%，远低于95%的安全值。当天晚上，王女士转入ICU病房。

ICU的第一招是无创呼吸机，勉强将她的血氧值维持在90%的“临界水平”。

病情继续恶化，ICU用了第二招“气管插管”，用上有创呼吸机后，仍然难以维持王女士的“氧需”，她的血氧一路降到70%到80%。

入院第48小时，王女士胸片影像已成“大白肺”。正常的肺是黑色影像，但因为严重炎症，她的肺显示白茫茫一片。

肺部已基本失去功能，如果不能快速改善，她的大脑和各个器官可能因“缺氧”衰竭，甚至导致死亡。

王女士的生命危在旦夕，经与家属沟通，2月8日凌晨1点，王女士用上了救命神器ECMO，用来替代她的肺，医护人员在股静脉处插管，将静脉血引流到体外，经过“人工肺”氧合，再将血液泵入体内。

中日医院詹庆元教授在“呼吸界”的访谈中说，病毒性重症感冒的治疗原则有3个：

一是 原发病 治疗，主要指抗病毒治疗。

二是 支持治疗 ，呼吸支持最重要。

三是 并发症和合并症 的治疗。

王女士的原发病是流感，有对症的抗病毒药物比如奥司他韦。虽然并发肾衰竭，感染鲍曼不动杆菌，但医生用肾脏替代疗法（CRRT）和抗生素一一解决，有惊无险。

从高流量吸氧-无创呼吸机-有创呼吸机-ECMO人工肺，这个顶级的呼吸支持神器，为治疗争取到宝贵时间。18天后，王女士顺利撤机，直到康复出院。

如果原发病没有对症药物，就像新冠肺炎和北京流感中的未知病毒肺炎，ECMO的作用是支持免疫系统和病毒直接对抗，类似“焦土策略”。

新冠病毒像蝗虫，侵占了肺部这块农田，引起免疫系统对病毒和细胞无差别的攻击，肺部成为一片焦土，病毒也最终死去。

好的结局是，ECMO代替肺维系着患者的生命。病毒死去后，肺部休养生息后，恢复供氧。

不好的结局是，免疫系统实施“焦土策略”时过度攻击，引发“炎症风暴”，导致肝肾等多器官衰竭，就如李文亮医生，或者北京中年中的岳父，合并耐药细菌严重感染；他们失去了宝贵的生命。

面对病毒性肺炎引起的呼吸窘迫症，ECMO作为顶级的呼吸支持手段，病毒和并发症的治疗决定战局。

据世界生命支持组织ELSO统计，ECMO的抢救成功率约50%。百分比背后，是一条条鲜活生命，一个个温暖家庭，一城一池也要夺。

另一个被广泛报道的ECMO用途是治疗爆发性心肌炎。

爆发性心肌炎是一种非常凶险的疾病，高发于小孩和40岁以下青壮年。发生率低，但死亡率高达70%。初始症状很像普通感冒，但病情进展相当凶猛，短时间内即可产生严重心脏损害，极易猝死。

2009年，一个爆发性心肌炎的11岁男孩被送到杭州第一人民医院。这个男孩送到医院时已经没了心跳。经过多轮CPR无效后，医生们想到了ECMO。

给孩子做上ECMO之后，他的心电监护还是一条直线，但意识居然是清楚的。ICU胡炜主任清楚得记得，那天孩子躺在病床上，身上插满了大大小小的管子。

忽然，孩子睁眼说了一句：“妈妈，我想喝可乐！”守在一旁的父母顿时泪如雨下。很快，孩子病情好转，撤机出院。

ECMO常用有V-V模式和V-A模式。

V-V模式是人工肺，用在急性呼吸窘迫综合征，比如得了病毒性肺炎的王女士。

V-A模式是心肺联合，用在心脏（心肺）衰竭的患者，比如得了爆发性心肌炎的男孩。还可以用在心脏修复手术、ECPR(体外心肺复苏)等。

最早的ECMO就用在心脏手术上。

它的原型来自美国心脏外科专家约翰·吉本发明的体外循环机。

1980年美国密歇根大学巴莱医生建立了首个ECMO中心，从此救命神器走出了手术室。

现任台北市长柯文哲，是大中华区推广ECMO第一人，他曾在台大医学院用“叶克膜”（台湾说法），将心脏功能丧失的“无心”病人生命维系了16天，然后做心脏移植救活。

本世纪初，柯文哲教授来大陆多家顶级心胸外科传授ECMO技术，包括北京阜外、安贞、上海胸科医院等。03年非典期间，ECMO开始在国内用于呼吸衰竭的患者。

ECMO作为顶级救命神器，即使公立三甲医院，也不是每家都有。好奇心驱使，我研究了魔都医院的情况。

根据上海体外循环专委会的相关报道，2018年上海有21家医院开展了ECMO技术，其中有18家公立三甲，而18年上海三甲医院的数量是38家。

上海有5家医院较早开展这项技术，ECMO的治疗病例也最多。他们是：上海胸科、仁济、中山、儿童医学中心、长海。

既然是抢救危重症的救命技术，为什么没有广泛开展？除了技术门槛高，还因为ECMO的昂贵。

ECMO的当天开机费用6万左右。

其中机器和耗材5万，穿刺管路和膜肺都从国外进口。还有穿刺操作费、化验费和药费，合计不到1万。

每天ECMO的维持费用是2千。其中人工肺的运转费用1千，化验和药费不到1千。

而重症患者一般都在ICU病房，每天费用也在1-2万。

ECMO费用加上ICU费用，就有了网上说的，ECMO开机6万，每天2万的说法。ECMO基本不进医保，需要自费。

有位疑似新冠肺炎的黄冈孕妇，在ICU住了一周多，使用ECMO抢救，治疗花了近20万。借的钱花光了，她老公决定放弃治疗。

她去世时，老公和医生都哭了，因为她是有可能治好的。放弃的第二天，国家宣布为新冠病人提供免费治疗。

这个令人悲伤的困境本可以用几百元的保费打破。市面上几款畅销的普通百万医疗和中端医疗险，大多能报销ECMO费用。

在医疗记录片里，时常看到医生的无奈和眼泪，有时是因为医疗技术的局限，更多是高额费用拷问的人心。

为了保护家人，需要提前做好安排。万一天有不测风云，我们可以坚定的对医生说，请用上救命神器ECMO。

参考资料：

（1）搜狐"CSTCVS": 2018年上海市首次ECMO专项技术质量控制督查风采 2018-12-05

（2）网络学术：2018年上海市体外膜氧合专项技术质控督查报告

（3）财新网重症科医生亲述：我们是怎样抢救危重病人的 2020-02-05

（4）搜狐“丁香园”：医生救人，就只是让人活着吗？2018-11-13

（5）呼吸界：詹庆元教授用经典病例告诉你救治重症流感的独家秘方 2018-01-14

（7）南方+：感冒6天成“大白肺”！ECMO助广州青年逃离死亡线 2018-02-28

（8）央视新闻网：重症肺炎孕妇去世：花光借来的20来万后放弃治疗 2020-01-29

Ⅳ 我的丁香园网站为什么在我的电脑上不能登录。

可以具体点吗~!我不太明白你的意思..

如果在你的电脑登陆不了话.建议你换个系统看看..

你的ID是认证你的网卡Mac地址.锁掉了...

皇家记者:逍遥神刀

Ⅳ 丁香园App里学霸答题打不开

网络原因。丁香园APP中的学霸答题无法打开是因为网络波动造成的软件卡顿。
1、首先点击打开网络设置。
2、然后点击“信号连接”，再点击“设置新连接”。
3、最后刷新界面即可。

Ⅵ 疫情之下，莫论得失｜汽车行业要屏住呼吸

增长减速是不可避免的，销量下降是不可避免的，产品推迟是不可避免的。即使如此，当下汽车行业最应该做的，也应该是配合职能部门做好疫情的防控。现在还不是谈论汽车行业损失的时候，皮之不存，毛将焉附？

战胜疫情，熬过黑夜，才有资格谈春光明媚。

本文来源于汽车之家车家号作者，不代表汽车之家的观点立场。

Ⅶ 看到新冒出的孵动力，它跟丁香园、小木虫有什么区别

你仔细想想吧，军事医学科学院老师会的小木虫和丁香园招生不？

Ⅷ 丁香人才简历已被下载什么意思

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Ⅸ 请问：冠状动脉CTA影像结果如何看

http://www.5aysd.com/bbs/医时代
http://www.dxy.cn/cms/丁香园
都是在职医生办的，都有咨询板块的，你可以上这两个网站咨询下，

Ⅹ 丁香园论坛，怎么新手求助的文献都没人找啊，大家谁知道还有更好的求助文献的方式，或者论坛！

丁香园是个医药抄综合论坛，但是新袭手求助很少有人帮助找，很郁闷的。

其实在校外下载文献是一件很容易的事情！很多名校都有自己专用的代理服务器或者数据库账号什么的，有很多免费的学术资源论坛就提供这些账户！有了这些账户，你就可以在校外下载CNKI、万方之类的了！！
不过这些账号也很容易死掉，因为大家都在用，用的多了就会被发现封杀了！
如果你需要的文献不多的话，像你只是需要财务方面的文献，

倒不如去类似~~~~“我要文献学术网”~~~~去求助文献，网络搜索网名，第一条就是了！所谓的求助文献，就是你发个帖子告诉人家想要什么文献，大家去帮你下，这是一种很好的互助方式！！
一分钟就注册了，去那个科研互助区求助！

祝你好运！~~