花卉接种员
(1)外植体的选择 常用的外植体有两类,一类是带芽的外植体,如茎尖、侧芽、鳞芽、原球茎等,一类根、茎、叶等营养器官和花药、花瓣、花轴、花萼、胚珠、果实等生殖器官。其中最常用的外植体是茎尖,通常切块在0.5厘米左右,培养脱毒种苗,常用茎尖分生组织部,长度为0.1毫米以下。
(2)外植体的灭菌 常用的消毒剂有次氯酸钙、升汞、次氯酸钠、双氧水、70%酒精等。
(3)外植体接种 外植体接种需在无菌条件下进行。工作人员应穿工作服,戴口罩,用70%酒精擦手,超净工作台上要用70%酒精擦净。接种用的剪刀、镊子和器皿都要求无菌。接种后的培养容器置培养室,室温应控制在23~26℃,每天12~16小时光照,光照度为1000~3000勒克斯。
(4)诱导侧芽、不定芽或胚状体 常用的基本培养基为MS培养基。激素的种类和浓度对外植体的分化和增殖起着重要的作用,不同的花卉对激素的种类和浓度要求有差异。
(5)诱导生根 继代培养形成的不定芽和侧芽等一般没有根,要促使试管苗生根,须转移到生根培养基上,生根培养基一般应用1/2MS培养基,因为降低无机盐浓度有利于根的分化。不同盆栽花卉诱导生根时所需要的生长素的种类和浓度不同,一般常用吲哚乙酸(IAA)、萘乙酸(NAA)和吲哚丁酸(IBA)三种。
(6)炼苗 首先打开试管瓶塞,放阳光充足处让其锻炼1~2天,然后取出幼苗,用温水将琼脂冲洗掉,移栽到泥炭、珍珠岩、蛭石、砻糠灰等组成的基质中。基质使用前需高温消毒。移栽后要适当遮荫,可用塑料薄膜覆盖,保持较高空气湿度,温度维持在25℃左右,勿使阳光直晒。7~10天后要注意通风和补充浇水。20~40天,新梢开始生长后,小苗可转入正常管理。
㈡ 花卉组织培养需要哪些设施和设备
组织培养已经在花卉的育苗上得到了广泛的应用,如大花蕙兰、蝴蝶兰、非洲菊、凤梨类、花烛类等主要用组织培养育苗,脱毒、复壮也用组织培养育苗。组织培养也叫微体繁殖,是根据植物细胞全能性的原理,在无菌的条件下,将离体的植物器官、组织、细胞、原生质等在适宜的培养基上培养,促其分裂分化,变成幼苗和成苗的技术。
(1)化学实验室。一般需15~20米2的房间。室内有供仪器洗涤、晾干、配制药剂和培养基的设备;有各种试管、三角瓶、烧杯、量筒、吸管等玻璃器皿;有精确度0.1克天平用来称量蔗糖、琼脂。精确度1毫克天平用来称量大量元素、精确度0.1毫克的分析天平用来称量微量元素和激素。至少有精确度0.1克和0.1毫克两种。备有所用的各种无机盐、维生素、氨基酸、糖类、琼脂、生长调节剂等。还要有冰箱、烘箱、高压蒸汽灭菌锅、水浴锅等。
(2)接种室。由两间连在一起的房间组成,其中一间作准备室,另一间作接种室,都要有照明灯和紫外灯。接种室内摆放操作台,放置酒精灯、接种工具、试管、三角瓶等。有条件的最好用超净工作台,并将超净工作台放在无菌室内。经济条件差也可用接种箱来接种,但生产量大时用起来不方便,费工。
(3)培养室。用于将接种到试管、三角瓶、罐头瓶等玻璃容器内的微小植物体(外植体)进行培养生长的场所。要有放置玻璃容器的培养架。要有控温设备,能调节和保持恒温的能力。要有照明和调节光照度的能力,并设有定时器加以自动控制。
㈢ 花卉的组织培养有哪几个步骤
组织培养的步骤:(1)器具的消毒:组培前玻璃器皿等要用洗衣粉刷洗干净备用。接种室和超净工作台用70%酒精擦洗,并用紫外光照射。其他用具也要进行高温消毒。
(2)培养材料的采集:组培所用的植物材料很广泛,可采用根、茎、叶、花、芽及种子的子叶、胚轴的一部分,有时也可利用花粉或花药。通常应取初生幼嫩的材料,因为这部分材料分生能力强。不论采集花卉的哪一部分材料,这些材料在移入培养基时都必须保持鲜嫩状态,否则组培将会失败。
(3)培养材料的消毒:先将采集来的材料用自来水冲洗干净,再用蒸馏水冲洗2~3遍,然后用无菌纱布将材料上的水分吸干,切成小块,放入70%酒精中浸泡15~30秒,再用30%漂白粉澄清液浸泡20分钟消毒,最后用无菌水冲洗3~5遍,使之彻底消毒灭菌。
(4)制备外植体:将上述经过灭菌的材料,用在火焰上消过毒的刀、剪、镊,在消毒滤纸上剥去芽的鳞片,嫩枝的外皮和种皮胚乳等,然后切成长0.2~0.5厘米的小片,这些小片就是外植体。在操作过程中,严禁用手触动这些材料。
(5)接种培养:在无菌条件下将切好的外植体立即接种在培养基上。接种后所用试管和三角瓶都要用无菌药棉封口,放培养室培养架上培养。培养架可用木制或铁制的,一般分为4~5层,每层高40~50厘米,日光灯装在上方,架长1.2米左右,与40瓦日光灯管长一致,宽80~90厘米,每一层可装两支日光灯,照度为2000~2500勒克斯。每天日光灯照明12~16小时。温度大多采用日夜恒温培养,以保持在25摄氏度0摄氏度。也可采用变温培养,夜间温度略低于白天。
㈣ 花卉的组织培养需要哪些设备
花卉组织培养是在人工控制的条件下培养花苗,是用现代化手段繁殖花回卉的一种最新技术,因此需答要一定的实验室和必要的设备以及玻璃器皿和用具等。其中最主要的设备是化学实验室、接种室和培养室。
化学实验室内需设置高压灭菌锅、分析天平、普通天平、酸度计、重蒸馏水蒸馏器、烘箱、冰箱、显微镜等仪器设备。接种室应紧靠培养室,内设超净工作台、安装紫外灯。
若没有接种室,使用无菌接种箱也可以接种。培养室要求清洁、干燥、保温性能好,但面积不宜过大,室内安装多层架子。架子上方安装有日光灯照明,并装有空气调节器控制温度。此外,还需要置备常用的大量试管、三角瓶、容量瓶、烧杯、量筒等玻璃器皿以及镊子、小型剪刀、解剖刀、接种针等用具。