花卉组织培养
⑴ 花卉组织培养有哪些目的
目前在花卉上应用组织培养技术繁殖的主要用于两个目的:(1)快速繁殖:利用组培内技术可达到快速繁殖的目容的,例如用一个兰花茎尖分生组织进行培养繁殖,理论上计算在1年内可繁殖出400万株小苗。再如花叶芋这种观叶植物,用常规的无性繁殖每年仅增殖几倍到十几倍,利用组培技术则可繁殖出几万至数百万倍的小幼苗。组培出来的幼苗都来自单一个体或同一种类品种,所以遗传性相当一致,不易出现变异。
(2)繁殖无病毒植株:病毒是长期一般无性繁殖中普遍存在的问题,它常引起花卉品质退化和减产。用茎尖分生组织进行培养可得到无病毒植株。这是因为病毒在植株体内的传播主要是通过输导组织的输导扩散的,病毒也能通过细胞进行渗透,但速度比较慢,而茎尖顶端分生组织的细胞分裂很快,同时还没有分化出输导组织,在茎尖分生区可以不受病毒感染。因此用组织培养切取的茎尖越短小,培养出的植株无病毒可能性就越大。经试验,目前国内外应用组织培养生产无病毒苗的花卉有兰花、康乃馨、人丽花、菊花、唐菖蒲、风信子、百合、鸢尾、天竺葵等等。
⑵ 花卉组培论文
不同基质对几种花卉组培苗移栽影响的试验研究
摘要:本试验通过对卡特兰、大花蕙兰、紫罗兰、新几内亚凤仙、捕蝇草、长寿花的组培苗移栽到不同的基质中,比较其成活率和长势,以期筛选出适宜各种花卉组培苗移栽的基质配方。结果表明:卡特兰组培苗最适宜移栽的基质为1/2苔藓+1/2砂子,移栽成活率高达100%;大花蕙兰组培苗最适宜移栽的基质为苔藓,移栽成活率达100%;非洲紫罗兰组培苗最适宜移栽的基质为蛭石,其成活率达到98%;新几内亚凤仙组培苗最适宜移栽的基质为1/2蛭石+1/2草炭,其移栽成活率为96.7%;捕蝇草组培苗最适宜移栽的基质为1/2椰绒+1/2珍珠岩,其移栽成活率达到100%;长寿花组培苗最适宜移栽的基质为1/3珍珠岩+2/3蛭石,其移栽成活率达到96.7%。
关键词:卡特兰;大花蕙兰;非洲紫罗兰;新几内亚凤仙;捕蝇草;长寿花;基质:移栽
当今植物生物技术已发展成为新技术革命的重要组成部分,在各个生产领域运用生物技术已收到了巨大的经济效益。其中利用组织培养进行种苗的快速繁殖是运用最广、效果最好的一项生物技术。组织培养繁殖种苗,具有能保持本品种特征特性,繁殖系数高,繁殖迅速,便于工厂化和集约化生产等特性,是人们广泛应用的一项技术。利用组织培养进行快繁具有常规方法无可比拟的优越性,所以组织培养是快速繁殖和无土栽培技术中较为热门的植物繁育方法。但在繁殖过程中,移栽是最为关键的一步,只有移栽成功,组培苗才能实现它的价值。为此,我们对卡特兰、大花蕙兰、非洲紫罗兰、新几内亚凤仙、捕蝇草、长寿花的组培苗进行了移栽试验,以期筛选出适宜移栽的基质配方。
l 材料与方法
1.1 试验材料
选用天津农学院组培实验室培养的卡特兰、大花蕙兰、非洲紫罗兰、新几内亚凤仙、捕蝇草、长寿花为移栽材料。移栽植株的大小为,卡特兰的叶展开度在2 cm~2.5 cm(厘米)之间,大花蕙兰的株高在7 cm(厘米)左右,新几内亚凤仙和长寿花的株高为3 cm(厘米)左右,非洲紫罗兰的叶展开度在3 cm(厘米)左右,捕蝇草的株高在3 Cm(厘米)左右。
1.2 方法
1.2、1 组培苗的锻炼将几种花卉的组培苗从培养室取出,放置于炼苗室中,室内温度保持在25℃左右,相对湿度保持在75%左右,避免阳光直射。放置2 d~3 d(天)后,打开瓶盖,让幼苗适应外界环境,早晚用喷雾器对幼苗和室内进行喷雾,以维持室内较高的湿度环境。经一个星期的炼苗过程,即可进行移栽。而捕蝇草在炼苗时,不打开瓶盖,放置3 d~4 d(天)后立即移栽。
1.2.2 移栽基质的准备将苔藓、树皮、椰绒等有机基质用1%KMnO4溶液浸泡3 h(小时),之后用清水反复冲洗干净,做到不残留KMnO4溶液;把砂子、蛭石、珍珠岩等无机基质收稿日期:2004—03—1366用常规灭菌法灭菌,后配成移栽各种花卉组培苗的基质配方。卡特兰的移栽基质配方为:①蛭石;②1/2苔藓+1/2砂子;③1/2苔藓+1/2蛭石;④苔藓;⑤1/2苔藓+1/2树皮。其具体做法就是在盆底分别放置树皮、砂子、蛭石,然后再在上面放上苔藓。移栽时要将卡特兰的根均匀分放于苔藓之中,要栽紧,栽实,使根系紧密接触苔藓,以吸收养份和水份。大花蕙兰的移栽基质配方为:① 苔藓;②1/2树皮+1/2碎石;③1/2苔藓+1/2砂子;④1/3树皮+1/3椰绒+1/3砂子;⑤蛭石。移栽时在盆底放上砂子,然后在砂子上面分别放上苔藓、椰绒+树皮、蛭石。把苗栽直、栽实,不能伤到根。非洲紫罗兰的移栽基质配方:① 蛭石;② 椰绒;③1/2蛭石+1/2草炭;④1/3蛭石+1/3砂子+1/3草炭;⑤7/15蛭石+7/15草炭+1/15鸡粪。将各基质按配方搅和均匀,将非洲紫罗兰栽紧,以防影响根系的生长。新几内亚凤仙的移栽基质配方:① 蛭石;②椰绒;③1/2蛭石+1/2草炭;④1/2蛭石+1/2砂子。将基质混合均匀后就可栽植新几内亚凤仙了。捕蝇草的移栽基质配方为:①蛭石;②苔藓;③1/2蛭石+1/2珍珠岩;④1/2椰绒+1/2珍珠岩。选植株较大的栽植到各基质中。移栽长寿花时选用的基质配方为:①蛭石;②1/2草炭+1/2蛭石;③1/5珍珠岩+2/5草炭+2/5蛭石;④1/2砂子+1/2土壤;⑤1/3珍珠岩+2/3蛭石。直接把长寿花栽植到各基质中。
1、2.3 移栽把基质放到经过消毒的塑料花盆中,组培苗经炼苗后就可移栽了。移栽是用镊子把各组培苗从培养瓶中取出,分成单株,用清水冲洗干净根上残留的培养基,要做到不伤根,然后分别用800倍的多菌灵溶液浸泡植株的根部20 rain(分钟)。选择生长势良好,植株健壮的组培苗,进行移栽。移栽后要用遮阳网遮荫,并用塑料薄膜覆盖,要常浇水和喷雾,保持湿度在80%左右;温度在22℃左右。捕蝇草的移栽苗要放置在装有水的水槽中,上方加盖遮阳棚和塑料薄膜,每天进行喷雾和浇水,避免苗子萎蔫。
2 结果与分析2.1 不同基质配比对卡特兰组培苗移栽成活的影响为了选出适合卡特兰组培苗生长的基质,我们选用了4种基质配比,对卡特兰组培苗进行移栽试验,并以蛭石做基质作为对照。不同基质移栽卡特兰组培苗成活率的比较从表1可以看出,卡特兰组培苗的移栽以1/2苔藓+1/2砂子的复合基质最为适宜,其幼苗移栽成活率可达100%,而且植株长势最强;其次的移栽基质是以1/2苔藓+1/2树皮和1/2苔藓+1/2蛭石的复合基质,幼苗的成活率在7O%以上;以单独苔藓为基质的更差一些;而用蛭石作为移栽的植株成活率最低,并且植株长势最弱。说明移栽卡特兰最好以苔藓加通透性强的基质为好。2.2 不同基质配比对大花葸兰组培苗移栽成活的影响在移栽大花蕙兰的试验中,我们选用了4种基质配方对大花葸兰的组培苗进行移栽,并以蛭石做基质作为对照,以比较哪种基质更适合大花葸兰苗的移栽和生长。不同基质移栽大花蕙兰成活率的比较从表2结果可以得出结论,以单独苔藓为基质的大花葸兰组培苗的移栽成活率最高,达到100%,而且植株长势最强,植株高度达到10.8 cm(厘米);而以1/2苔藓+1/2砂子和1/2树皮+1/2碎石为基质的次之,以1/3树皮+1/3椰壳纤维+1/3砂子为基质时的成活率更低一些;以蛭石为基质的成活率最差,植株长势最弱。说明大花葸兰组培苗的生长需要较好的通透性,以苔藓和苔藓加大颗粒的基质为好。2.3 不同基质配比对非洲紫罗兰组培苗移栽成活的影响选用4种基质和蛭石为对照对非洲紫罗兰的组培苗进行移栽试验,比较各种基质中组培苗的成活率和长势。观察一个月后,调查成活率和植株开展度,结果如表3所示。从表3可以看出,不同基质移栽非洲紫罗兰组培苗,其成活率和长势有很大的差异,其中以移栽到蛭石中的其成活率和植株开展度明显高于其它几种基质配比的,成活率达到98%,开展度达11.0 cm(厘米);而以1/2蛭石+1/2草炭、1/3蛭石+1/3砂子+1/3草炭和椰绒为基质的植株成活率和长势逐渐下降;但以7/15蛭石+7/15草炭+1/15鸡粪为基质移栽非洲紫罗兰时,其成活率明显低于其它几种基质,说明在移栽非洲紫罗兰组培苗时,不宜在基质中添加有机肥料。最适合非洲紫罗兰组培苗移栽的基质为蛭石。2.4 不同基质配比对新几内亚凤仙组培苗移栽成活的影响选用4种基质配方和以蛭石为对照对新几内亚凤仙组培苗进行移栽试验,将移栽后的凤仙组培苗放入保温、保湿的塑料棚中,移栽一个月后进行调查。新几内亚凤仙组培苗的移栽适应多种基质,以1/2蛭石+1/2草炭的基质移栽凤仙组培苗为最好,成活率达到87.1%,植株高度达12.5 cm(厘米);在蛭石、椰绒和1/2蛭石+1/2砂子中组培苗的成活率也较高,生长情况也较好;但在1/2树皮+1/2碎石中,组培苗的成活率最低,只有33.3%,生长最差,只达5.3 cm(厘米)。说明凤仙组培苗的生长要求保水性较好的基质,而通透性强的基质不适合凤仙的移栽。2.5 不同基质配比对捕蝇草组培苗移栽成活的影响捕蝇草是起源于美洲沼泽地带的一种植物,其具有捕虫的功能,是一种有一定经济价值的植物。为了研究其组培苗移栽成活的情况,我们选用了3种基质和蛭石作为对照进行捕蝇草的移栽试验,以期筛选出适宜的捕蝇草移栽配方。移栽一个月后调查其植株成活率和植株长势用1/2椰绒+1/2珍珠岩移栽捕蝇草时,其组培苗成活率最高,达到100%,而且植株长的最大,达到5.0 cm(厘米);其次是以苔藓为基质的,成活率为9O%,植株开展度为4.1 cm(厘米);再次为以1/2蛭石+1/2珍珠岩为基质的,成活率为78.6% ;而以蛭石为基质的成活率最低,只有46.7%。这说明以1/2椰绒+1/2珍珠岩配制成的基质更适合于捕蝇草组培苗的生长。2.6 不同基质配比对长寿花组培苗移栽成活的影响为了选出适合长寿花组培苗生长的基质,我们选用了5种基质配比,对长寿花组培苗进行了移栽试验,以比较哪种基质更适合长寿花的生长。观察一个月后,我们进行了调查,结果如表6所示。从表6可以看出,长寿花组培苗在几种基质中的成活率都比较高,而且植株的长势也比较接近,说明长寿花适合多种基质的移栽。但其中以1/3珍珠岩+2/3蛭石的基质最适合。
⑶ 花卉组织培养有哪些途径
在花卉组织培养实践中,用植物的组织或细胞培养成植株,也就是试管培养,内可以通过三条容途径。
(1)通过花卉器官发生:通过由培养的组织,产生芽及根,器官发生由于培养材料的不同又可分为两方面:一是培养花卉植物的茎尖产生大量芽,再将芽分离转移培养成植株;二是培养花卉植物器官外植体产生不定芽,发育成植株。
(2)通过花卉愈伤组织分化成株:将花卉植物体的一小片组织培养成愈伤组织,再诱导分化成芽和根,成为完整植株。
(3)通过花卉胚状体发生:由培养的植株产生愈伤组织,再通过悬浮培养,或直接产生大量的胚状体,再发育成完整植株。
⑷ 花卉组织培养要怎样接种
接种:接种用的来钳子、自解剖刀、接种针等均需在火焰上消毒后用,用后再消毒。将消毒好的材料置于培养皿中,用解剖刀切去其边缘,再切成小块接种在培养基上,使组织块与培养基密合,不得将材料陷于培养基中,接好后随即将瓶口封好待培养。
培养:接种完毕后即可置于培养室,在恒温、加光条件下进行培养,培养一段时间后,根据情况将材料从诱导愈伤组织的培养基转到分化培养基,最后转移到生根培养基上。
⑸ 花卉的组织培养有哪几个步骤
组织培养的步骤:(1)器具的消毒:组培前玻璃器皿等要用洗衣粉刷洗干净备用。接种室和超净工作台用70%酒精擦洗,并用紫外光照射。其他用具也要进行高温消毒。
(2)培养材料的采集:组培所用的植物材料很广泛,可采用根、茎、叶、花、芽及种子的子叶、胚轴的一部分,有时也可利用花粉或花药。通常应取初生幼嫩的材料,因为这部分材料分生能力强。不论采集花卉的哪一部分材料,这些材料在移入培养基时都必须保持鲜嫩状态,否则组培将会失败。
(3)培养材料的消毒:先将采集来的材料用自来水冲洗干净,再用蒸馏水冲洗2~3遍,然后用无菌纱布将材料上的水分吸干,切成小块,放入70%酒精中浸泡15~30秒,再用30%漂白粉澄清液浸泡20分钟消毒,最后用无菌水冲洗3~5遍,使之彻底消毒灭菌。
(4)制备外植体:将上述经过灭菌的材料,用在火焰上消过毒的刀、剪、镊,在消毒滤纸上剥去芽的鳞片,嫩枝的外皮和种皮胚乳等,然后切成长0.2~0.5厘米的小片,这些小片就是外植体。在操作过程中,严禁用手触动这些材料。
(5)接种培养:在无菌条件下将切好的外植体立即接种在培养基上。接种后所用试管和三角瓶都要用无菌药棉封口,放培养室培养架上培养。培养架可用木制或铁制的,一般分为4~5层,每层高40~50厘米,日光灯装在上方,架长1.2米左右,与40瓦日光灯管长一致,宽80~90厘米,每一层可装两支日光灯,照度为2000~2500勒克斯。每天日光灯照明12~16小时。温度大多采用日夜恒温培养,以保持在25摄氏度0摄氏度。也可采用变温培养,夜间温度略低于白天。
⑹ 花卉组织培养要怎样消毒灭菌
消毒灭菌:消毒灭菌非常重要,关系到组织培养的成败。污染的途径是器皿、用具、回材料的带菌,以及接种室答的空气、墙壁、地板等的不清洁,故必须针对所提及的几方面,进行严密的消毒灭菌。
第一、培养基消毒:将配制分装好培养基的三角瓶或其它容器放入高压灭菌锅中,在15磅/英寸2的压力下,经20分钟高压灭菌即可。
第二、器皿与用具的消毒:接种用具及玻璃器皿、洗涤材料用的无菌水,用牛皮纸包好后和培养基一起放在高压灭菌锅中消毒灭菌。
第三、接种室消毒:接种室的地面及墙壁,在接种前后均要用1:50的新洁尔敏湿性消毒,每次接种前还要用紫外线灯照射消毒30~60分钟,并用70%的酒精,在室内喷雾,以净化空气,最后是超净台台面消毒,可用新洁尔敏擦袜及70%酒精消毒。
第四、材料处理及消毒:花卉组织培养取嫩茎、花托、叶柄、叶片均可,取得材料后,需先清理,去掉多余部分,然后冲洗、洗涤剂洗涤、漂清后放入接种室或超净台上,用70%的酒精浸泡半分钟,进行表面消毒,再在10%的漂粉溶液中消毒10分钟左右,取出后用无菌水冲洗4~5次,即可接种。
一般材料的选择以幼嫩部分为好。草花用嫩茎、花托为好;球根花卉用茎顶、鳞茎盘、鳞叶等为好。
⑺ 盆栽花卉组织培养技术流程有哪些
(1)外植体的选择 常用的外植体有两类,一类是带芽的外植体,如茎尖、侧芽、鳞芽、原球茎等,一类根、茎、叶等营养器官和花药、花瓣、花轴、花萼、胚珠、果实等生殖器官。其中最常用的外植体是茎尖,通常切块在0.5厘米左右,培养脱毒种苗,常用茎尖分生组织部,长度为0.1毫米以下。
(2)外植体的灭菌 常用的消毒剂有次氯酸钙、升汞、次氯酸钠、双氧水、70%酒精等。
(3)外植体接种 外植体接种需在无菌条件下进行。工作人员应穿工作服,戴口罩,用70%酒精擦手,超净工作台上要用70%酒精擦净。接种用的剪刀、镊子和器皿都要求无菌。接种后的培养容器置培养室,室温应控制在23~26℃,每天12~16小时光照,光照度为1000~3000勒克斯。
(4)诱导侧芽、不定芽或胚状体 常用的基本培养基为MS培养基。激素的种类和浓度对外植体的分化和增殖起着重要的作用,不同的花卉对激素的种类和浓度要求有差异。
(5)诱导生根 继代培养形成的不定芽和侧芽等一般没有根,要促使试管苗生根,须转移到生根培养基上,生根培养基一般应用1/2MS培养基,因为降低无机盐浓度有利于根的分化。不同盆栽花卉诱导生根时所需要的生长素的种类和浓度不同,一般常用吲哚乙酸(IAA)、萘乙酸(NAA)和吲哚丁酸(IBA)三种。
(6)炼苗 首先打开试管瓶塞,放阳光充足处让其锻炼1~2天,然后取出幼苗,用温水将琼脂冲洗掉,移栽到泥炭、珍珠岩、蛭石、砻糠灰等组成的基质中。基质使用前需高温消毒。移栽后要适当遮荫,可用塑料薄膜覆盖,保持较高空气湿度,温度维持在25℃左右,勿使阳光直晒。7~10天后要注意通风和补充浇水。20~40天,新梢开始生长后,小苗可转入正常管理。
⑻ 花卉的组织培养需要哪些设备
花卉组织培养是在人工控制的条件下培养花苗,是用现代化手段繁殖花回卉的一种最新技术,因此需答要一定的实验室和必要的设备以及玻璃器皿和用具等。其中最主要的设备是化学实验室、接种室和培养室。
化学实验室内需设置高压灭菌锅、分析天平、普通天平、酸度计、重蒸馏水蒸馏器、烘箱、冰箱、显微镜等仪器设备。接种室应紧靠培养室,内设超净工作台、安装紫外灯。
若没有接种室,使用无菌接种箱也可以接种。培养室要求清洁、干燥、保温性能好,但面积不宜过大,室内安装多层架子。架子上方安装有日光灯照明,并装有空气调节器控制温度。此外,还需要置备常用的大量试管、三角瓶、容量瓶、烧杯、量筒等玻璃器皿以及镊子、小型剪刀、解剖刀、接种针等用具。
⑼ 花卉组织培养需要哪些设施和设备
组织培养已经在花卉的育苗上得到了广泛的应用,如大花蕙兰、蝴蝶兰、非洲菊、凤梨类、花烛类等主要用组织培养育苗,脱毒、复壮也用组织培养育苗。组织培养也叫微体繁殖,是根据植物细胞全能性的原理,在无菌的条件下,将离体的植物器官、组织、细胞、原生质等在适宜的培养基上培养,促其分裂分化,变成幼苗和成苗的技术。
(1)化学实验室。一般需15~20米2的房间。室内有供仪器洗涤、晾干、配制药剂和培养基的设备;有各种试管、三角瓶、烧杯、量筒、吸管等玻璃器皿;有精确度0.1克天平用来称量蔗糖、琼脂。精确度1毫克天平用来称量大量元素、精确度0.1毫克的分析天平用来称量微量元素和激素。至少有精确度0.1克和0.1毫克两种。备有所用的各种无机盐、维生素、氨基酸、糖类、琼脂、生长调节剂等。还要有冰箱、烘箱、高压蒸汽灭菌锅、水浴锅等。
(2)接种室。由两间连在一起的房间组成,其中一间作准备室,另一间作接种室,都要有照明灯和紫外灯。接种室内摆放操作台,放置酒精灯、接种工具、试管、三角瓶等。有条件的最好用超净工作台,并将超净工作台放在无菌室内。经济条件差也可用接种箱来接种,但生产量大时用起来不方便,费工。
(3)培养室。用于将接种到试管、三角瓶、罐头瓶等玻璃容器内的微小植物体(外植体)进行培养生长的场所。要有放置玻璃容器的培养架。要有控温设备,能调节和保持恒温的能力。要有照明和调节光照度的能力,并设有定时器加以自动控制。
⑽ 花卉组织培养的培养基要怎样配制
培养基配制:选定培养基以后,需把大量元素、微量元素、有机物都配成母液,扩大版倍数为稀释液,贮存备用权。使用时,根据所需配制的量,在稀释液中加一些肌醇、水解酪蛋白、蔗糖等,再加铁盐配成营养液,然后吸取需用量,加入培养基中,再测其酸碱度,一般要求PH值在5.5~6.5之间,最后加琼脂煮沸后分装入三角瓶或试管中,封口待用。