丁香園退行

❶ 骨病常識

1.如何進行骨病分類
骨病一般包括：風濕性關節炎、類風濕性關節炎、退行性關節炎、強直性脊柱炎、頸椎病、腰椎病、肩周炎、骨質增生、股骨頭壞死、產後風等。

風濕性關節炎風濕性關節炎（rheumatoid arthritis）是一種常見的急性或慢性結締組織炎症。可反復發作並累及心臟。

臨床一以關節和肌肉遊走性酸楚、重著、疼痛為特徵。屬變態反應性疾病。

是風濕熱的主要表現之一，多以急性發熱及關節疼痛起病。 類風濕性關節炎類風濕性關節炎（rheumatoid arthritis）是一種以關節滑膜炎為特徵的慢性全身性自身免疫性疾病。

滑膜炎持久反復發作，可導致關節內軟骨和骨的破壞，關節功能障礙，甚至殘廢。血管炎病變累及全身各個器官，故本病又稱為類風濕病。

退行性關節炎退行性關節炎又稱肥大性關節炎，是指一些老年人常常會有腰痛、腿痛、關節痛。由於它多見於老年人，因而也稱作老年性關節炎。

老年性退化，是引起退行性關節炎的主要原因。中老年後，一切組織器官都會發生退行性變化；骨和關節組織也不例外，退行性變化，尤其好發於承重的關節和多活動的關節。

過度的負重或過度的使用某些關節，可促進退行性變化的發生。此外，如關節內骨折、糖尿病、長期不恰當地使用腎上腺皮質激素等因素，均可促進退行性變化的形成和加速已存在的退行性變化的發展。

強直性脊柱炎強直性脊柱炎屬風濕病范疇，血清陰性脊柱關節病的一種。該病敗租因尚不明確，以脊柱為主要病變的慢性病，累及骶髂關節，引起脊柱強直和纖維化，造成不同程度眼、肺、肌肉、骨骼病變，屬自身免疫性疾病。

近些年利用中醫葯在臨床上取的進展性突破，中醫四聯修復再生療法—通過補氣血、活腎、化瘀、修復四效合一，從內及外整體調理治療，調節功能擾亂等系統治療取得明顯效果，無論病史長短，患病年齡大小，均可在15-30天見效，症狀逐漸消失，治癒後不易復發。 結果臨床應用25605例，少則2-3周期，症狀基本消失，6個月至3年隨訪，無1例復發。

頸椎病頸椎病又稱頸椎綜合征，是頸椎骨關節炎、增生性頸椎炎、頸神經根綜合征、頸椎間盤脫出症的總稱，是一種以退行性病理改變為基礎的疾患。主要由於頸椎長期勞損、骨質增生，或椎間盤脫出、韌帶增厚，致使頸椎脊髓、神經根或椎動脈受壓，導致一系列功能障礙的臨床綜合征。

表現為頸椎間盤退變本身及其繼發性的一系列病理改變，如椎節失穩、松動；髓核突出或脫出；骨刺形成；韌帶肥厚和繼發的椎管狹窄等， *** 或壓迫了鄰近的神經根、脊髓、椎動脈及頸部交感神經等組織，並引起各種各樣症狀和體征的綜合征。 腰椎病醫學上所講的腰椎病，涵蓋了「腰椎間盤突出、腰椎骨質增生、腰肌勞損、腰扭傷、腰椎退行性病變、風濕或類風濕性腰痛、腰椎結核、風寒濕性腰痛、瘀血性腰痛、濕熱性腰痛、腎虛性腰痛、頸椎病」等疾患。

肩周炎肩周炎是以肩關節疼痛和活動不便為主要症狀的常見病症。本病的好發年齡在50歲左右，女性發病率略高於男性，多見於體力勞動者。

如得不到有效的治療，有可能嚴重影響肩關節的功能活動察悶兆。據臨床觀察，醫院常用葯合盛堂罩宏宗予以治療，本病早期肩關節呈陣發性疼痛，常因天氣變化及勞累而誘發，以後逐漸發展為持續性疼痛，並逐漸加重，晝輕夜重，肩關節向各個方向的主動和被動活動均受限。

肩部受到牽拉時，可引起劇烈疼痛。肩關節可有廣泛壓痛，並向頸部及肘部放射，還可出現不同程度的三角肌的萎縮。

骨質增生骨質增生症又稱為增生性骨關節炎、骨性關節炎（OA）、退變性關節病、老年性關節炎、肥大性關節炎，是由於構成關節的軟骨、椎間盤、韌帶等軟組織變性、退化，關節邊緣形成骨刺，滑膜肥厚等變化，而出現骨破壞，引起繼發性的骨質增生，導致關節變形，當受到異常載荷時，引起關節疼痛，活動受限等症狀的一種疾病。 骨質增生分原發性和繼發性兩種。

股骨頭壞死股骨頭壞死，又稱股骨頭缺血性壞死，為常見的骨關節病之一。大多因風濕病、血液病、潛水病、燒傷等疾患引起，先破壞鄰近關節面組織的血液供應，進而造成壞死。

其主要症狀，從間斷性疼痛逐漸發展到持續性疼痛，再由疼痛引發肌肉痙攣、關節活動受到限制，最後造成嚴重致殘而跛行。 激素葯亦會導致本病的發生。

中醫認為疾病發生原因為外因和內因，且內因外因相互作用，使人體陰陽失去平衡，氣血的失恆而生疾，亦稱"髀樞痹"、"骨痹"、"骨萎"。
2.骨科知識：日常生活中如何保護骨健康
有人覺得關節炎只是一種「老年病」，但今時今日這種觀念該更新了，因為最近10年來，骨關節炎在年輕人中的發病率也在上升。如果你也即將或已經步入30歲，最好要加以防護，開始學習骨關節的保健養生的方法了。

頸關節：注重姿勢多做操

點頭和搖頭時，經常會用到我們的頸關節。頸椎特別是脊椎最上面的3塊骨頭很靈活，可一旦受損傷，就會變得非常僵硬。看電腦、熨衣服都會讓你的身體向前彎曲，容易給椎間盤造成壓力，進而加重頸椎關節僵硬，所以辦公時最好不要長時間低著頭。

保護建議：日常生活中，可以將下巴盡量下壓貼近胸部，然後抬頭看天花板。動作緩慢，連做5次，再同樣緩慢地將頭部左右下壓10次，這樣有利於鍛煉頸關節。

肩關節：走路擺臂+舉手拉伸

學生族或坐班族常常有肩關節酸痛、僵硬，甚至肩關節活動受限的困擾。究其原因就是肩關節活動不足。其實肩關節是全身比較輕松的一個關節，因為肩膀平時不承受任何重量，所以肩關節重度磨損的幾率較小。如果肩關節活動不足，起初的症狀為洗頭等動作困難，然後是肩膀僵硬。

保護建議：在日常生活中，不要固定一個姿勢太久。如果做些雙手舉過頭頂拉伸的動作，可提高肩部靈活度。為防止弓腰駝背增加肩關節磨損，每天可將肩部大幅度向後轉動10次。另外，走路時擺臂也有很大幫助。

肘關節：拉把手用滑鼠要注意

舉重物會導致肘關節損傷，同時做伸臂和旋轉這樣的動作，也會拉傷肘關節附近的韌帶。很多人都知道「網球肘」或「高爾夫肘」，這是反復用力做肘部運動造成的。

保護建議：抓東西時最好將把手換成大號的，這樣就不會太費勁。使用電腦時，滑鼠最好離身體近點，以免拉伸肘關節韌帶。每天彎曲伸直手臂10次，可以讓肌腱和韌帶保持柔軟。

指腕關節：常做抓握+活動手腕

手指的關節比腕關節更容易發生磨損。尤其是那些長時間做手工活，比如織毛衣或者在生產線上的女性，發病率非常高，常常會覺得大拇指根部疼痛。

保護建議：日常生活中，最好不要老讓手長時間保持同一姿勢，經常做做抓握動作，或者一手握拳，另一手抱住拳頭，左右上下活動手腕。活動越多樣化，對腕關節和手關節越有利。

膝關節：少負重+控制運動量

人體60%的體重都是由膝關節的內側支撐的，因此膝關節內側的半月板非常容易勞損，髕骨軟骨在長時間摩擦之後也容易出問題，因此人過30歲之後，要特別注意膝關節的保養。在日常生活和運動中，忽然運動用力過猛，急速扭轉，會讓膝關節受到沖擊，極其容易受傷；平時未經鍛煉的情況下，突然長時間行走或跑動，也容易造成半月板或髕骨軟骨的損傷；過度肥胖，也是膝關節損傷的一個重要原因。

保護建議：如果你的膝關節經常疼痛或出問題，應該盡量避免爬山、上下樓梯等對膝關節壓力較大的運動，即使是膝關節一直保持健康，長跑和負重登山等運動也要適量。日常鍛煉中，倒著走是對膝蓋最好的鍛煉方式，能讓膝蓋關節充分運動靈活，是一項很好的熱身運動。
3.有朋友知道怎麼才能更好的學習骨科知識嗎
怎麼說呢，一點一點的看唄，學習骨科首先要知道解剖啊，運動系統的解剖是必須要動得，再就是神經系統的解剖也必要是要懂的。

循環系統也是必須要懂得，還有就是看一下專業的書籍了，入門的可以看一下骨與關節損傷了，如果想了解有關骨病方面的可以看一下實用骨科學，不過這本書個人感覺不是很好，但是別的還真沒有發現比較好的，剛才說的骨與關節損傷個人感覺4版比較好，完全可以當教材使用，很基礎。有時間也要學習一下影像學的知識，而這個和解剖很有關系，斷層的解剖是必須要學好的。

再就是骨科涉及到手術，最基本的清創縫合，縫皮等簡單的手術操作技巧是要懂得。平時多從網上學一些專業的知識，丁香園、醫學生論壇等網站都是不錯的，骨科看似簡單但是真正要是干好其實不易，是很具技巧性的，手術中要靈活運用了，到了後期很多都是經驗的積累了。

而且骨科手術必須要時時的更新，很多新的觀點技術也是你要懂的，所以慢慢學吧，路漫漫其修遠兮，你就慢慢學吧，不可能一天兩天就能學會的。希望這些對您能有所幫助。

❷ 患有椎-基底動脈供血不足能根治嗎

首先應明確到底是不是椎動脈供血不足，包括良性發作性位置性眩暈、耳部疾患、小腦病變等許多均可導致，排除其他問題後方可診斷。其次，椎動脈供血不足原因很多，包括：①動脈粥樣硬化，動脈管腔變窄。②椎動脈受機械性壓迫，發生狹窄或閉塞，或頸交感神經受刺激，引起椎動脈痙攣。引起椎動脈受壓或痙攣的原因，最常見的是頸椎病，由此產生的眩暈稱頸性眩暈，由於骨刺及退行性關節炎、椎間盤病變，使椎動脈易受壓迫，當轉頸時一側之椎動脈更易受壓，若椎動脈本身已有粥樣硬化，一側椎動脈受壓迫後，對側椎動脈無法代償則出現症狀，症狀常與頭頸轉動有密切關系。③基底動脈的舒縮功能發生障礙。④椎-基底動脈的畸形或發育異常。⑤鎖骨下動脈盜學綜合征（又稱偷漏綜合征），一側鎖骨下動脈的第一部分（靠近椎動脈起源處）由於動脈硬化、感染、先天異常、外傷等原因而發生狹窄或閉塞，當該側上肢用力時或活動時，健側椎動脈的血液可倒流入患側的椎動脈，再流入患側鎖骨下動脈的遠側端，以供應患側上肢的需要，但供血量仍不足。此時可產生椎-基底動脈供血不足的各種臨床症狀和體征。⑥動脈內膜炎、多發性大動脈炎、頸動脈炎、結締組織病、梅毒、貧血、真性紅細胞增多症、外傷等。所以，應進一步查明原因治療。

椎基底動脈供血不足性眩暈是影響中老年人健康的常見病和多發病，近年來國外有研究報道稱血管結構異常是椎基底動脈供血不足眩暈發病的主要形態學基礎。椎基底動脈供血不足性眩暈是神經內科的常見病、多發病,它的發病基礎復雜。目前認為椎基底動脈供血不足性眩暈的發病機理主要有：①微小動脈栓塞②腦血管痙攣③腦血流動力學發生改變④頸椎病
椎-基底動脈供血不足的病因多而復雜,有些病因和發病機制目前尚不清楚,如椎-基底動脈系統的血管管壁結構的年齡變化、分子生物學指標和生物力學的改變;頸部軟組織對椎動脈的影響;上、下位頸椎間活動時對椎動脈的影響;椎動脈周圍神經叢因素致VBI的機制;頸椎鉤突和橫突孔骨贅生長的相關因素等
非葯物治療建議做些相應的檢查，老年患者多見由於頸椎退行性病變所制，可以拍個正，側位的頸椎片看看是否有椎動脈收壓，最好到康復醫學科檢查看是否可以做些牽引理療，注意調整好牽引時的重量和體位，否則可能還會加重症狀，另外可以考慮做正規的手法治療，一定要結合症狀和頸椎片做推拿，也可以推拿手法和牽引配合，以前在康復科給椎基底動脈供血不足導致的頸椎病人做感覺效果不錯。

80%腦卒中為缺血性。20%的缺血性事件發生於後循環(椎基底動脈系統)供血的組織(圖1)。椎基底動脈性腦卒中所導致的癱瘓可能極具破壞性，有些類型死亡率很高1。許多椎基底動脈疾病病例被漏診或被誤診2。一些常見症狀，例如眩暈或短暫的意識喪失，常被錯誤地歸因於後循環缺血。以前，臨床醫師用「椎基底動脈供血不足」這一籠統術語來解釋所有後循環缺血病例的血流動力學原因1,3,4。在過去15年中，詳細的臨床研究和腦部影像學檢查提供的資料徹底改變了我們對後循環缺血的臨床表現、病因、發病機制、治療和預後的理解1,3。

病因和血管病變

椎基底動脈供血不足的最常見病因是栓塞、大動脈粥樣硬化、穿支小動脈病變以及動脈夾層5-8。少見的病因有偏頭痛、血管肌纖維發育異常、凝血性疾病以及濫用葯物。栓子來源於心臟、主動脈以及近端的椎動脈和基底動脈1,3,5。大動脈粥樣硬化的分布因人種和性別而異9,10。男性白人的動脈粥樣硬化常常發生在鎖骨下動脈發出椎動脈的起始處。這個部位有粥樣硬化的病人常常有頸動脈、冠狀動脈以及周圍血管的病變9-13。顱內大動脈粥樣硬化最常見於黑人、亞洲人和婦女1,9,10,12。
供應腦乾和丘腦的小動脈起源於顱內椎動脈、基底動脈和大腦後動脈(圖1)。高血壓增加這些動脈發生透明脂肪性增厚的可能性，這種情況進而導致小范圍的梗死14。上級動脈的粥樣硬化可以阻塞或擴展到這些穿支動脈的起始部或在這些分支血管內形成微小粥瘤，導致動脈阻塞(顱內分支動脈粥瘤病)15,16。
動脈夾層發生於顱外椎動脈的移動度最大部分。這部分椎動脈包括延伸到上部頸椎的第三段和介於起始部與椎間孔之間的第一段1,17,18。

症狀和體征

在椎基底動脈阻塞症患者中，常見症狀包括頭昏、眩暈、頭痛、嘔吐、復視、失明、共濟失調、麻木和累及軀體兩側結構的無力。最常見的體征包括肢體無力、步態和肢體運動共濟失調、眼球運動障礙和口咽功能障礙。後循環缺血很少只引起單一症狀，而是根據發生缺血的區域不同而引起一系列症狀和體征。新英格蘭醫學中心後循環登記(NEMCPCR)顯示，不到1%的椎基底動脈缺血病人只出現單一症狀或體征1,3,5。

常見表現形式

栓塞
最常見的動脈栓塞部位有顱內椎動脈(常導致小腦梗死)和遠端基底動脈(常導致小腦上部、中腦、丘腦以及大腦後動脈供血區域梗死，也就是所謂的基底動脈尖梗死)1,3,5,19-22。有小腦梗死的病人經常報告頭昏，偶爾並發明顯眩暈、視力模糊、行走困難和嘔吐。他們通常身體偏向一側而且不能坐直，無人幫助的情況下也不能保持直立姿勢。病人梗死側的上肢可能有肌張力減退，檢查這個體征的最好方法就是，讓病人雙手向前伸直，然後快速放下雙手，並迅速停住。肌張力減退的手臂在下降或快速抬起時往往動作過度。眼球震顫也是常見表現。單純小腦梗死的病人沒有偏癱或一側感覺喪失。
栓塞性梗死可累及一側大腦後動脈，這種情況經常導致對側視野偏盲1,3,20,23，如圖2所示的病人。圖2描述的病人有椎動脈阻塞，導致了與低位腦干相關的短暫性腦缺血發作(TIAs)，後來有右側大腦後動脈的動脈內栓子，引起枕葉梗死和左側偏盲。有時，在偏盲側的同側肢體和面部也存在半側感覺神經性症狀。左側大腦後動脈的大范圍梗死通常伴有閱讀困難和顏色辨認困難，而右側大腦後動脈的梗死則可能伴有左側視野喪失和定向障礙。雙側大腦後動脈的梗死則導致雙側視野缺損，有時也導致皮質性盲。病人也可能出現無法形成新記憶和煩燥狀態1,3,21,22。中腦前側和丘腦的栓塞性梗死可導致有下列特徵的基底動脈尖綜合征：嗜睡和有時為昏迷；無法形成新記憶；瞳孔縮小且對光反射不良；垂直凝視缺陷1,3,21,22。

動脈粥樣硬化性血管狹窄與阻塞
頸部椎動脈起始處或附近發生的動脈粥樣硬化狹窄通常表現為有短暫性腦缺血發作，包括眩暈、視覺聚焦困難以及平衡功能缺失13，這些症狀通常在病人直立時、血壓下降或血流量下降時發作，與延髓和小腦內的前庭小腦結構缺血有關13。有些病人的大腦後動脈、小腦動脈或基底動脈尖的症狀和體征會突然發生，為椎動脈阻塞性病變栓塞所致。
顱內椎動脈的粥樣硬化性狹窄或阻塞常常導致與外側髓質被蓋缺血相關的症狀和體征，也就是所謂的Wallenberg(或者外側髓質)綜合征(表1和圖3A)。顱內椎動脈的阻塞同樣可以成為頭端基底動脈及其分支栓子的來源。當雙側顱內椎動脈均被累及時，最常見的臨床表現就是經常由站立或血壓下降促發的視力減退和共濟失調。在NEMC-PCR中，407例病人中的13例有對血流動力學敏感的缺血發作，通常由雙側顱內椎動脈阻塞性疾病所致，他們多次發生眩暈、肢體向一側歪斜、口周感覺異常和復視的短暫發作5,24。
基底動脈的粥樣硬化性狹窄和阻塞通常導致兩側症狀和體征或交叉性表現(累及一側面部和對側軀干肢體)1,3,25,26。病人主要出現軀體運動和眼球運動的體征和症狀(表2)，當嚴重的時候，可以導致閉鎖綜合征(圖3。

穿支動脈疾病
旁正中腦橋的梗死可導致表現為面部、上肢和下肢無力或一側上下肢無力，但沒有視覺、感覺、認知或行為異常為特徵的單純運動性腦卒中。有時，四肢無力也可以顯示為小腦型功能失調，也就是共濟失調性偏癱1, 3, 14-16。丘腦腔隙性梗死可表現為單純感覺性腦卒中，出現一側面部和上下肢的麻木或感覺異常，而沒有運動、視覺、認知或行為的異常1, 3, 14,16。
動脈夾層
椎動脈夾層病人的主要症狀是疼痛，最常見於後頸部或枕部，可波及肩部1,17,18。也可發生彌漫性頭痛，大多數為枕部頭痛。顱內椎動脈栓塞或動脈夾層蔓延到顱內椎動脈可導致眩暈、復視和外側延髓或小腦梗死的體征。顱內椎動脈夾層可導致延髓、小腦和腦橋的缺血，也可以導致蛛網膜下腔出血27。

通常不是後循環疾病所致的症狀

一些表現為全身性、循環性、前庭性和聽覺性的症狀常常被錯誤地歸因於後循環缺血所致。

單獨發作的頭暈、頭昏或眩暈
「頭暈」或許可以指頭昏、頭腦不清或明顯眩暈。眩暈指外周前庭系統或中樞前庭小腦系統功能紊亂。外周前庭病患者的眩暈發作通常由突然的運動和位置的變化引起，並通常並發聽覺症狀。椎動脈疾病可導致暫時性眩暈發作，並且通常伴發腦干或小腦的其他症狀。根據我們的經驗，持續3周以上的單純眩暈幾乎肯定不是椎基底動脈疾病所致。在罕見情況下，幾乎只見於糖尿病病人，基底動脈供應內耳的小腦前下動脈分支阻塞可以在引起腦干梗死前導致眩暈和/或單側聽力喪失28。
頭昏通常反映的是與循環系統疾病、全身性疾病或心臟病有關的暈厥前表現。在沒有神經系統症狀或體征的情況下，頭昏極少是椎基底動脈缺血的表現。孤立性暈厥病人中神經血管檢查(神經影像學檢查和超聲檢查)的診斷陽性率很低29。孤立性暈厥並不增加腦卒中的風險30。在我們所遇到的407例病人中，只有7%的病人報告有頭昏症狀，而且沒有1例病人以頭昏為獨立的症狀1,3,5。

短暫的意識喪失
癲癇和暈厥是比腦血管病更常見的導致短暫性意識喪失的病因。維持覺醒狀態的網狀激活系統位於腦幹上部的旁正中被蓋。基底動脈阻塞可以擾亂這些神經纖維的功能並影響意識，昏迷就有可能發生。但是，基底動脈阻塞常常導致其他伴隨症狀，例如眼球運動和肌肉運動的體征。

跌倒發作
跌倒發作的定義是沒有任何先兆地突然失去體位控制並跌倒。跌倒伴意識喪失說明暈厥或抽搐可能是原因。跌倒發作曾被不適當地歸因於後循環的短暫缺血。腦幹缺血可影響控制肢體運動的皮質脊髓束，在腦幹缺血時，通常會出現持續四肢無力。在NEMC-PCR中，沒有1例病人以跌倒發作作為惟一症狀1,3,5。在缺乏提示腦干或小腦功能紊亂的症狀和表現時，後循環缺血很少是跌倒發作的原因。

疑有後循環缺血病人的評價

全面評價病史以及體格檢查和神經系統檢查的結果，可以指導進行哪些檢查。所有懷疑椎基底動脈區域卒中或TIAs的病人都要接受神經系統影像學檢查，最好是磁共振成像檢查(MRI)，因為計算機化體層攝影檢查(CT)受顱骨偽影的影響不能全面顯示腦干結構。採用彌散加權成像技術進行的MRI是現有檢出急性梗死的最敏感方法。後循環卒中的大部分病人和與後循環供血區相關的持續時間超過1小時的部分TIAs病人，在彌散加權成像檢查時都顯示有急性病變31-33。在罕見情況下，一些急性椎基底動脈卒中病人的彌散加權成像可能正常，但這種結果並不能排除梗死。隨訪研究常常顯示與臨床表現相符的梗死34。磁共振血管造影術可被用來明確頸部大血管阻塞和顱內病變的部位和嚴重程度31,35。
安有心臟起搏器或有不允許行MRI檢查的其他情況的病人，應該接受CT和CT血管造影檢查，除非有進行這些檢查的禁忌證。高質量CT血管造影可被用來顯示顱外和顱內的後循環，對評價疑診基底動脈阻塞的病人非常有用36。多普勒超聲檢查也可被用來顯示近端椎動脈37，頸部椎動脈的多普勒檢查可以顯示血流是順行還是反流。頭部多普勒檢查可被用來顯示顱內椎動脈和近端基底動脈的阻塞病變。頸動脈超聲檢查在評價後循環缺血病人方面幾乎沒有作用。在罕見栓塞病例中，大腦後動脈異常地直接起源自顱內頸總動脈。
包括心電圖、超聲心動圖以及心律監測在內的心臟檢查，是尋找心臟和主動脈源性栓子的重要評價方法，特別是對於沒有頸部和顱部血管阻塞可以解釋臨床症狀和體征的病人，以及不同血管供血區的多發腦梗死病人。
血液篩查和凝血功能檢查應該包括全血細胞計數和凝血檢查。有病史提示以前有靜脈性或動脈性阻塞，或未發現心臟、主動脈或頸部顱內血管病變的病人，可能適合進行其他先天性和獲得性凝血病的檢查以及抗磷脂抗體的檢查。
准確診斷特殊類型腦卒中以及血管和腦部病變需要以下條件：人口統計學評估(年齡、種族和性別)和卒中危險因素評價；有關症狀演化過程的知識(例如，腦卒中發生之前是否有單次或多次變異型或經典型TIAs，發作是否突然和發作之前沒有TIAs，缺血是否是進行性的)；病人的症狀和體征與已知缺血類型的關系；腦部和血管的影像學檢查。

預 後

椎基底動脈性腦卒中的轉歸取決於神經系統體征的嚴重程度，是否有動脈病變，梗死的部位和范圍，以及缺血的機制1,38。後循環腦卒中後的立即死亡率約為3%～4%38,39。在NEMC-PCR中，3.6%的病人死亡，18%的病人有嚴重殘疾38。無論病人的年齡和潛在危險因素如何，心臟栓塞、基底動脈受累和顱內多區域受累都增加預後不良的風險38。基底動脈阻塞性疾病具有很高的致死和致殘風險，我們應該努力盡早確定這種病變。

緊急預防措施

現在已有多種葯物性、介入性和手術的療法可被用於治療大腦後循環的缺血，但是沒有一種方法經過隨機試驗的徹底檢驗。可以採用的治療與大腦前循環缺血使用的治療相同。然而，很少試驗將缺血性腦卒中病人依照是前循環疾病還是後循環疾病進行分類。在進行了這種分類的試驗中，只有少數評價並報告了腦卒中的心臟、動脈和血液學原因。

短期葯物療法
國家神經系統疾病和卒中研究所(NINDS)的試驗顯示，用CT排除腦出血後，在腦卒中發生後3小時內靜脈注射組織纖溶酶原激活物(t-PA)可以增強缺血性卒中的神經系統功能恢復40。3項關於椎基底動脈疾病靜脈注射溶栓葯物的試驗顯示了不同結果41-43。根據NINDS的指南，Grond等在12例病人腦卒中發生後3小時內給予t-PA治療，其中10例轉歸較好，1例轉歸較差和1例死亡41。另一項研究對5例病人在腦卒中發生後6小時內給予t-PA治療42，2例有輕微的部分再灌注，1例有完全再灌注。3例死亡，1例保持在「閉鎖」狀態。Montavont等在18例病人發生腦卒中後7小時內給葯治療43。在治療後3個月，18例中有10例可獨立生活(即他們可以照料自己，沒有或只有輕微的殘疾)，但2例死亡，6例預後情況差43。
溶栓葯物也可以通過導管直接動脈內給葯，注射到血栓處。在一項對65例椎基底動脈阻塞病人的回顧性研究中，43例病人接受了尿激酶或鏈激酶的治療，其中三分之二病人在腦卒中發生後24小時內接受治療，與22例接受抗凝葯物治療的病人相比，他們的生存率較高和預後較好。在接受溶栓葯物治療的病人中，只有阻塞血管再通的病人才生存44。另9項報告顯示，在大多數都於腦卒中發生後8小時以上接受t-PA治療的285例病人中45，62%有良好的血管再通，全部病人中28%在以後也血運良好。Brandt等發現，在51例接受溶栓療法治療急性椎基底動脈病變的病人中，栓塞病變血管較短、累及近端基底動脈並有較好側支循環者最有可能出現血管再通，並有良好臨床轉歸。昏迷或四肢癱瘓的病人或有慢性腦白質異常的病人，則預後差46。
臨床醫師目前尚無充分數據可資指導是選擇靜脈溶栓療法還是動脈溶栓療法來治療椎基底動脈性缺血。如果病人在腦卒中發生後3小時內就診，則一些神經科醫師按照NINDS指南，在CT排除腦出血後，採用靜脈內注射t-PA進行治療。我們主張在決定是否採用溶栓療法之前，特別是在症狀出現時間已經超過3個小時或診斷不肯定的情況下，可對病人進行腦和血管的影像學檢查(CT和CT血管造影術，或彌散加權MRI和磁共振血管造影術)。如果發現椎動脈阻塞，我們採用靜脈注射t-PA治療。如果影像學檢查結果提示基底動脈阻塞，我們則推薦行腦血管造影術和動脈內溶栓療法，因為基底動脈阻塞時死亡和致殘的危險升高，而且已有動脈內溶栓療法的廣泛經驗，在這種情況下，即使是發生腦卒中後12～24小時也可以進行動脈溶栓治療44,45。
一些顱內椎基底動脈阻塞性疾病患者對血壓下降和血容量減少(甚至是坐起或站立)所引起的腦灌注量的變化很敏感24,47。對於這些病人，用液體和升壓葯最大程度提高血流量和血容量很重要。
預防
隨機對照試驗的強有力證據支持，心源性栓子所致腦卒中病人採用華法林抗凝能有效地預防以後的腦血管事件。一項回顧性研究在68例動脈造影證實顱內動脈狹窄的有症狀病人中，對華法林和阿司匹林的療效進行了比較，結果顯示，華法林對椎基底動脈阻塞性疾病的病人療效更好48。但是，在一項納入顱內血管狹窄達50%～99%的有症狀病人的前瞻性雙盲研究中，在569例病人被隨機分配到華法林組或阿司匹林(1300 mg)組後提前終止了試驗，因為結果顯示，兩種葯物療效相同，但華法林會導致顯著更嚴重的出血49。華法林-阿司匹林復發性腦卒中二級預防研究也顯示，阿司匹林和華法林對非心源性栓子所致腦卒中的療效相同50。
前瞻性試驗的結果顯示，抗血小板葯物(阿司匹林、噻氯匹定、氯吡格雷、雙嘧達莫以及阿司匹林加雙嘧達莫)對TIAs和腦卒中的病人有益。但是，只有2項研究分析了試驗結果與動脈供血區之間的關系，無一項研究報告血管阻塞性病變的性質。對於腦血管的二級保護，噻氯匹定的療效優於阿司匹林，尤其是對於有症狀的後循環疾病的病人51。在歐洲腦卒中預防研究中，在臨床確診椎基底動脈供血區TIAs或腦卒中的病人中，在255例聯合應用阿司匹林和改良雙嘧達莫緩釋劑型的病人中有5.7%發生腦卒中，而接受安慰劑治療者有10.8%(P=0.005)52。
對於有大動脈狹窄和小動脈疾病的病人，我們採用抗血小板葯物治療。對於有限制血流量的嚴重大動脈狹窄和椎動脈夾層的病人18，我們考慮抗凝治療，以預防遠端栓塞和梗死的進展。當影像學檢查顯示有動脈粥樣硬化斑塊時，我們還使用他汀類葯物，除非病人的低密度脂蛋白膽固醇水平低於70 mg/dl(1.8 mmol/L)53。在接受葯物治療的過程中還不斷發生缺血性事件的大動脈粥樣硬化狹窄的病人，應當根據動脈病變的性質和位置，轉診行手術、血管成形術或者支架置入術治療(見下述)。隨機臨床試驗在設計時應當旨在闡述哪種治療方法最適於特殊腦卒中機制和動脈阻塞性病變。

未來方向

血管內治療手段
散在病例報告提供的證據顯示，椎基底動脈血管成形術和支架置入術可能成為大動脈性椎基底動脈疾病的重要治療方法。對頸部閉阻塞性椎動脈病變進行血管成形或支架置入治療的初步結果顯示，再狹窄問題比採用頸動脈支架置入治療者更多見54。椎動脈起始處血管內徑小和成角彎曲使血管內治療更為復雜。顱內椎動脈和基底動脈的血管成形術和支架置入術得出了混雜的結果，並發症的發生率相對較高55。盡管結果只是初步的，但機械性清除血栓栓子可能對那些不能接受溶栓葯物病人很有用，並可以作為溶栓治療的輔助方法56。我們期待大規模對照研究對血管內血運重建與各種葯物療法進行比較。

手術
當由經驗豐富的外科醫師進行手術時，血管內膜剝脫術治療嚴重顱外椎動脈疾病的並發症率和死亡率都很低57。椎動脈手術的適應證尚未明確。在顱內血管成形術出現之前，有人採用手術方法在顱外動脈與顱內後循環之間建立搭橋分流，並取得一些成功，但尚無臨床試驗證實其療效。(N Engl J Med 2005; 352: 2618-26. June 23, 2005.) (李雁、***程 譯)
作者單位： Department of Neurology, Beth Israel Deaconess Medical Center, Harvard Medical School, Boston. Address reprint requests to Dr. Savitz at the Division of Cerebrovascular Disease, Department of Neurology, Palmer 127, Beth Israel Deaconess Medical Center, 330 Brookline Ave., Boston, MA 02215, or at [email protected].

❸ micro RNA二級結構

RNA干擾及其應用進展
孫德惠1,2,才學鵬1*,常惠芸1 ,獨軍政1
(1.中國農業科學院蘭州獸醫研究所家畜疫病病原生物學國家重點實驗室農業部畜禽病毒學重點開放實驗室,甘肅蘭州 730046;2.甘肅農業大學動物醫學院,甘肅蘭州 730070)

摘 要:RNA 干擾(RNA interference,RNAi)是一種由雙鏈RNA介導的基因沉默現象.RNAi主要發生在核外,RNAi具有操作簡便快速等特點.RNAi現象自發現至今已逾10年,在此期間,已將研究重點由機理研究轉向應用研究.文章以RNAi的應用為重點,從RNAi的起源,可能的作用機制,作用特點,研究方法,應用前景及展望等方面進行了綜述.
關鍵詞:RNA干擾;雙鏈RNA;基因沉默
RNAi是Napoli C D等[1]在試圖向紫色矮牽牛花轉導色素合成基因,用以增加其花色時發現的.結果出乎預料,轉基因的植株不僅沒有新基因的表達,反而自身的色素合成也減弱了,一些轉基因的花出現了全白色或部分白色.他們把這種導入的基因未表達和植物本身合成色素基因的失活現象命名為共抑制(cosuppression).之後,Ramano等在向粗糙孢菌�(Neurospora crassa)�中導入合成胡蘿卜素的基因時造成失活,他們稱為基因靜止(quelling).Guo S等[2]發現正義RNA與反義RNA有相同水平的抑制效應,但未能就此現象給出合理的解釋.Fire A等[3]在研究反義核苷酸時發現在線蟲體內,雙鏈RNA( double stranded RNA,dsRNA)能有效地抑制有互補序列的內源性基因,且抑制效果優於單鏈反義RNA.至此,正式提出了雙鏈RNA誘導的RNAi的概念,開啟了RNAi研究的序幕.
1 RNAi可能的作用機制及特點
1.1 RNAi的作用機制
雖然RNAi作用的確切機制尚不清楚,但目前普遍認可是Bass假說.具體概括為三個階段.
(1)起始階段.在細胞內,雙鏈RNA(dsRNA)由核酸酶Ⅲ(RNaseⅢ) Dicer 在ATP的參與下被處理為21個～23個鹼基的小RNA,即小干擾RNA(small interfering RNA,siRNA).siRNA是由19個～21個鹼基配對形成的雙鏈,並在其3′末端有兩個游離未配對的核苷酸.研究發現, siRNA 是RNAi 作用發生的重要中間分子,序列與所作用的靶mRNA 的序列具有高度同源性;雙鏈的兩端各有2個～3個突出的非配對的3′鹼基;兩條單鏈末端為5′端磷酸和3′端羥基.這些是細胞賴以區分真正的siRNA和其他雙鏈RNA的結構基礎. 研究表明,平末端的siRNA 或失去了5′磷酸基團的siRNA 不具有RNAi 的功能[4]
(2)引發階段.siRNA與Argonaute蛋白家族及其他未知因素結合,形成siRNA-核蛋白復合物(siRNA-ribonucleoprotein complex,siRNP).siRNP在ATP及其他未知因素參與下,使雙鏈siRNA解旋形成RNA誘導的沉默復合物(RNA incing silencing Complex ,RISC).RISC可能以完全單鏈或兩條鏈解旋但不完全分離的形式存在,繼而RISC在dsRNA的介導作用下與互補mRNA結合,並將其降解.mRNA被降解在轉錄後水平,抑制基因表達,因而又稱之為轉錄後基因沉默( posttranscriptional gene silencing,PTGS)
(3)循環放大階段.在siRNA誘導的RNAi過程中,可能還存在siRNA 的循環放大過程,以維持它的RNA誘導功能.此過程推測是以siRNA為引物,互補mRNA 為模板,在RNA依賴性RNA合成酶(RNA-dependent RNA Polymerase,RdRP) 的作用下,合成新的雙鏈RNA,再由Dicer作用,產生新的siRNA,完成siRNA 的放大過程,開始新的RNAi循環[5].
關於對RNAi機制中重要酶的作用研究,Zamore P D等[6]發現,21 nt RNA指導mRNA的降解; Scharf W D等[7]發現ATP依賴的RNA解旋酶為Mut6;Grishok A等[8]發現Let-7和lin-4為內源性的RNAi基因(stRNA);Dalmay T等[9]提出RNA依賴的RNA多聚酶就是SDE-1; Bernstein E等[10]證實RNaseш樣的核酸酶為Dicer; Elbashir S M等[11]應用外源性21 nt-siRNA能夠抑制同源mRNA的表達;Novina C D等[12]證實無論是針對病毒感染細胞所需的CD4受體,還是針對病毒基因組的gag區域,siRNA都可以有效地使病毒與細胞的基因沉默,抑制HIV的感染與復制.
1.2 RNAi的作用特點
(1)"共抑制"性.RNAi是雙鏈RNA介導的轉錄後基因沉默機制,它的啟動子相當活躍,外源基因可以轉錄,但不能正常積累mRNA;RNAi作用不僅使外源基因在轉錄後水平上失活,同時誘導與其同源的內源基因沉默.
(2)高效性.試驗證明雙鏈RNA干擾mRNA 翻譯的效率比單純反義或正義RNA 的抑制效率提高了幾個數量級;RNAi可在低於反義核酸幾個數量級的濃度下,使靶基因表達降到很低水平甚至完全"剔除",而產生缺失突變體表型.它比基因敲除技術更為便捷,科學家稱RNAi技術為靶基因或靶蛋白的"剔降"(knockdown).
(3)高特異性.由dsRNA降解成的小干擾RNA,除其正義鏈3′端的兩個鹼基在序列識別中不起主要作用外,其餘鹼基在序列識別中都是必需的,單個鹼基的改變即可使RNAi失效,RNAi能特異性降解mRNA,針對同源基因共有序列的RNAi則可使同源基因全部失活.
(4)高穿透性.RNAi具有很強的穿透能力,能在不同的細胞間長距離傳遞和維持,如在含有雙鏈RNA的溶液中,餵食表達雙鏈RNA的細菌等,能向秀麗隱桿線蟲導入雙鏈RNA.
(5)"遺傳性".已在線蟲中觀察到RNAi效應通過生殖系傳遞到後代,說明RNAi具有一定的可遺傳性.
(6)高穩定性.細胞中可能存在天然的穩定siRNA的機制.此機制可能是siRNA與某種保護性蛋白結合,從而使其具有相對的穩定性,這些雙鏈RNA 不像反義核酸那樣需要多種化學修飾來提高其半衰期.
(7)雙干擾系統.哺乳動物中存在有非特異性干擾和特異性干擾兩條獨立的途徑. 非特異性干擾反應是由大於30個鹼基對的雙鏈RNA介導,導致整個細胞中非特異性蛋白合成抑制,RNA降解;特異性反應由21 bp～25 bp的小干擾RNA介導,可逃避非特異性干擾系統的"監控",只降解與其序列相應的單個基因的mRNA[11].
2 研究方法
在研究過程中,科研人員逐漸摸索總結出了成套的研究方法.目前,展開RNAi操作主要有兩種方法.一種為直接將靶向特定基因的大約21個鹼基長短siRNA,或45個~50個鹼基的發夾結構RNA(small hairpin RNA,shRNA)轉染到細胞,shRNA在細胞中會自動被加工成siRNA,從而引發基因沉默或表達抑制.另一種為構建特定的siRNA表達載體,通過質粒在體內表達siRNA而引發基因沉默.此法的優點是排除了RNA酶干擾,延長siRNA半衰期.更重要的是,該法可以進行穩定表達細胞株的篩選,且隨著質粒復制擴散到整個機體,基因抑制效果可傳代.試驗表明,可被化學合成或體外合成的siRNA抑制的基因同樣可被表達相同序列的載體表達出的siRNA所抑制.
3 RNAi的應用
3.1 基因功能研究
在神經生物學研究中,科學家們通過siRNA表達質粒對中腦腹側神經細胞中的多巴胺能相關基因進行了有效抑制,還通過病毒介導的RNAi建立了此類成年小鼠模型,不僅為建立神經系統的功能缺失模型找到了一些有價值的表型標記,對神經系統的基因治療也有一定借鑒意義;在癌症研究中,通過shRNA表達載體成功抑製成年大鼠腦癌基因,同時對RNAi的遠程(穿過血腦屏障)基因沉默方法進行了非常有益的探索;利用細胞凋亡途徑,通過RNAi抑制凋亡基因Caspase-8能提高患急性肝功能衰竭小鼠的成活率,並發現Caspase 8 siRNA處理對特異性Fas激活劑(Jo2和AdFasL)和野生型腺病毒介導的急性肝功能衰竭都有效,表明這個動物模型能反應人類急性病毒肝炎多分子參與的機制,增強了siRNA用於急性肝炎病人治療的希望.除了對某些關鍵基因的RNAi研究外,還在哺乳動物細胞中探索了siRNA在基因組水平上的篩選方法.他們建立了一個包含8 000多個基因的siRNA表達框文庫陣列,通過它來高通量篩選NF-kB信號途徑中已知的及Unique基因.由此可見,RNA干擾也正作為篩選成百甚至上千基因的工具,發揮著越來越大的作用[13].RNAi為系統地抑制RNA分子合成蛋白提供了快速而相對簡便的途徑.通過在一段時間內對一個基因RNA信號的抑制,研究者可以深入研究基因功能,進而描繪支配從細胞形態到信號系統的遺傳網路.
3.2 基因治療及葯物篩選探索
由於RNAi是針對轉錄後階段的基因沉默,相對於傳統基因治療對基因水平上的敲除,整個流程設計更簡便,且作用迅速,效果明顯,為基因治療開辟了新的途徑.其總體思路是通過加強關鍵基因的RNAi機制,控制疾病中出現異常的蛋白合成進程或外源致病核酸的復制及表達.尤其針對引起一些對人類健康嚴重危害的病毒,如2003年在全球多個國家和地區流行的SARS,病原體是單鏈核酸的新型冠狀病毒,尋找葯物靶點,設計核酸葯物就更為方便.目前已經有很多公司在積極開發這方面的葯物,如在SARS葯物研究中一鳴驚人的美國俄勒岡州的AVI BioPharma生物制葯公司等.國內也有很多研究機構及生物技術公司投入了這方面的工作.如上海生科院成立了SARS防治科研攻關小組,其中生化細胞所和葯物所的一些課題組在從RNAi的角度努力.此外,北京大學,中南大學,北京動物所等大專院校和研究機構,以及北京金賽獅反義核酸技術開發有限公司等,也開展了RNAi葯物的研究與開發.
基因治療方面最引人注目的進展之一是對肝炎病毒的RNAi研究.Mccaffrey A P等通過表達shRNA的載體在細胞水平和轉染HBV質粒後免疫活性缺失的小鼠肝臟中成功抑制了HBV復制.與對照相比,小鼠血清中測得的HBsAg下降了84.5%,免疫組化對HBcAg的分析結果下降率更超過99%.哈佛大學Lieberman研究小組通過注射針對Fas的siRNA,過度激活炎症反應,誘導小鼠肝細胞自身混亂.然後給測試小鼠注入 Fas hyperdrive的抗體,發現未進行siRNA處理的對照組小鼠在幾天中死於急性肝功能衰竭,而82%的siRNA處理小鼠都存活下來,其中80%~90%的肝細胞結合了siRNA.並且,RNAi發揮功能達10 d,3周後才完全衰退.由於Fas很少在肝細胞外的其他細胞高水平表達,它對其他器官幾乎沒有副作用.此外,這個小組還和其他研究者積極開展針對HIV的RNAi測試,目前報道他們使用的針對CCR5蛋白的siRNA能阻止HIV進入免疫細胞約3周,在已經感染的細胞中也能阻止感染病毒的復制.
然而,盡管取得了不少研究成果,但要真正用於醫療還需時日.目前大多數還停留在小鼠測試階段,siRNA的導入多採用靜脈或腹腔注射,尾部注射,細胞移植等,如何對人進行有效的給葯,既能確保葯效在靶器官靶組織有效釋放,還要具有高度安全性等問題都需進一步研究.人們期待著RNAi引領的新醫學革命的到來.
在葯物篩選領域,除了線蟲這種低等動物的RNAi高通量葯篩模式外,Lavery K S等對RNAi在葯篩領域的應用前景進行了高度評價,RNAi技術將逐漸成為葯物靶點篩選和鑒定的強大工具.他對如何在葯篩的各個階段應用RNAi做了具體描述及展望,並指出將這項技術與高通量篩選,體外生物檢測和體內疾病模式相結合,將提供大量基因功能方面的有用信息,在葯物開發過程的多個階段促進靶點的有效篩選.
3.3 抗腫瘤治療
多種癌基因可以作為靶點設計相對應siRNA[14].Brummelkamp T R等[15]用逆轉錄病毒載體將siRNA 導入腫瘤細胞中,特異性抑制了癌基因K2RAS (V12)的表達.對急性髓性白血病的研究已經取得了較好的結果.Scherr M等[16]以引起慢性髓性白血病和bcr2abl陽性急性成淋巴細胞白血病的bcr2abl癌基因為靶基因,設計了對應的siRNA,並獲得了87% 的有效抑制率.Wilda M等[17]用siRNA抑制白血病BCR/ABL融合基因表達也取得了成功. 因此,基於RNAi 技術的抗腫瘤治療葯物開發潛力巨大.有報道稱,一種全新生物工程葯品"RNA干擾劑"(非干擾素)業已浮出水面,並有望在3年內上市.經過多年的探索,科學家終於發現,在癌細胞和病毒RNA的22對鹼基中有1對鹼基專門負責復制工作,只要能使這對鹼基"休眠",癌細胞或病毒就會自動停止復制.這一重要發現為一種全新葯物——RNA干擾劑奠定了基礎.科學家們相信,艾滋病,乙型肝炎,惡性膠質瘤(惡性腦瘤)和胰腺癌等疾病有望成為RNA干擾劑的第一批受益者(2004年經FDA批准已開始RNA干擾劑的臨床試驗),艾滋病,中樞神經系統退行性病變疾病如多發性硬化症,阿爾茨海默病,帕金森病等將成為第二批受益者.
3.4 抗病毒治療
由於RNAi 是機體中古老而天然的抗病毒機制,目前國外科技人員利用此特點,已設計出針對HIV gag,tat,rev,nef等基因的siRNA,針對丙型肝炎病毒非結構蛋白5B基因的siRNA,針對脊髓灰質炎病毒衣殼蛋白和多聚酶基因的siRNA,針對口蹄疫病毒3D片段siRNA等[18],均在試驗中取得理想結果.陸續有關通過RNAi抑制其他病毒在細胞內復制的報道如呼吸道合胞病毒,人乳頭瘤病毒,乙型肝炎病毒,丙型肝炎病毒[19]等,國內也已設計出針對口蹄疫病毒VP1基因的siRNA,針對丙型肝炎病毒5′保守區的siRNA,針對口蹄疫病毒IRES和L串聯序列兩側的保守區的siRNA[20],針對SARS冠狀病毒的6個siRNA,即RL001,R L002,RL003,RL004,RL005和RL006,均已取得理想結果.針對病原的siRNA已經進行到動物實驗階段[21],向病毒病的有效防治邁出了堅實的一步.由此可見,利用RNAi技術將使病毒病的有效治療成為可能.
3.5 轉基因研究
在動植物的轉基因試驗中, 經常發生基因沉默.因此, 對轉基因沉默機制的探索可以為在轉基因研究中避免基因沉默提供對策.在轉基因植物研究中避免基因沉默可提高試驗成功率,且節省時間,而在大型動物轉基因研究中避免基因沉默可節約成本,提高產率.
3.6 幹細胞研究
在幹細胞研究方面,在dsRNA阻斷大鼠骨髓源性神經幹細胞 Hes5表達的試驗中[22],觀察外源性短dsRNA在轉錄後水平mRNA水平降低基因表達的效率,並對其影響因素進行了初步探討.同時基於幹細胞可能擁有自己的一套基因組,不同類型的幹細胞又擁有各自所特有的基因,這些基因可能是決定幹細胞特性的最關鍵的實質性因素.因此,RNAi技術在此領域應用空間廣闊.
3.7 研究信號傳導的新途徑
Biotech認為,聯合利用傳統的缺失突變技術和RNAi技術可以很容易地確定復雜的信號傳導途徑中不同基因的上下游關系,Clemensy等應用RNAi研究了果蠅細胞系中胰島素信息傳導途徑,取得了與已知胰島素信息傳導通路完全一致的結果.RNAi技術較傳統的轉染試驗簡單,快速,重復性好,克服了轉染試驗中重組蛋白特異性聚集和轉染率不高的缺點,因此認為RNAi技術可能成為研究細胞信號傳導通路的新途徑.
3.8 常見病的治療
Nature雜志報道了miRNA(Micro RNA)的應用上一個重要發現,成功採用miRNA調節了胰島素的分泌,這為糖尿病的治療帶來新的希望,也將為糖尿病的新葯研究帶來新的曙光和思路.據Sicence雜志報道,顯示應用RNAi技術可有效降低血管內膽固醇含量,對治療心血管疾病有明顯的作用.
4 展望
綜上所述,RNAi技術在基因功能研究,抗腫瘤治療,抗病毒治療,基因應用研究,常見病的治療等許多方面都是強有力的工具和手段.同時做為新興的生物技術,還有廣闊的研究和應用空間期待著科研人員的探索.例如,siRNA在病毒持續性感染過程中扮演怎樣的角色 siRNA在冬眠動物體內的作用如何 RNAi在雀斑形成中起到怎樣的作用 如上述問題得到解決,將進一步依據其機理及特點,有望應用於病毒持續性感染的鑒別診斷及治療,利用siRNA在冬眠動物體內的作用進行星際航行,以解決能量供應及時間躍遷問題,RNAi應用於祛除雀斑等.
盡管在RNAi方面的研究已取得許多突破性進展,尤其是哺乳動物細胞中的研究的報道逐漸增多,但由於RNAi機制尚未完全闡明,仍有許多問題尚未得到徹底解答.例如,siRNA 在哺乳動物細胞中抑制mRNA表達是有效的, 但達不到果蠅細胞那樣的高抑制率, 可能是因為生物進化水平越高,調控基因表達系統的復雜程度相應的越高,多種抑制機制間相互作用的頻率也越高,抑製作用受到的影響因素也就越多.另外, 在哺乳動物中,RNAi能否成功地抑制基因表達以及抑制的程度還取決於細胞類型.對線蟲來說,可以採用注射,浸泡或餵食的方法轉入dsRNA,而對哺乳動物來說,尋找高效的方式來轉入siRNA以及快速的方式來篩選siRNA仍在進一步探索中.RNAi在抗病毒感染中的應用令人鼓舞, 但要取得最終的成功還有很漫長的路要走.其中一個關鍵的原因是siRNA並不能對所有病毒RNA發生作用,有些病毒靶序列可能隱藏在二級結構下, 或者位於高度折疊的區域中, 而有些病毒序列可能與蛋白質形成緊密的復合物, 阻礙了與siRNA 的識別.因此,不僅要選合適的靶序列,而且需要反復試驗.另一個重要的原因是病毒子代的突變率較高, 這使病毒可逃避siRNA 的識別.為了克服這個障礙,所選病毒RNA的靶序列必須是高度保守的, 或者設計數對siRNA同時作用[23].
總之,RNAi作為一種新發展起來的分子生物學技術,不可避免地會存在潛在的問題,這就要求研究者在利用該技術時要考慮到生物安全性等諸多問題,以使RNAi技術更好地為人類服務.
參考文獻(略)