磁珠丁香

❶ 農桿菌介導的轉基因玉米種子的獲得

1．1用基因槍法獲得的轉基因小麥 1992年對利用現代生物技術改良小麥而言是具有歷史意義的一年。Vasil等以長期培養的胚性愈傷組織為外植體，通過基因槍將GUS/Bar基因導入小麥品種「Pavon」，獲得對除草劑Basta具有抗性再生植株(T0)及其後一下（T1），從而宣告世界上第一株轉基因小麥問世。一年後，同一研究組又對基因方法進行了優化，以未成熟胚及其愈傷組織為外植體，在3個小麥基因型(Pavon、Bobwhite和RH770019)上獲得成功，並且將獲得轉基因小麥植株的時間由15個月縮短至7-9個月。在這一年，Weeks等也報道以品種「Bobwhite」的未成熟胚為外植體通過基因槍法獲得轉基因小麥植株。兩個獨立的實驗室用同一品種(Bobwhite)的相同組織（未成熟胚）和相同的方法（基因槍法）都得到相同或相似的結果（獲得轉基因植株），表明所用的轉基因方法是可靠的。此後，以未成熟胚（或稱為「幼胚」）及其衍生物為外植體，通過基因槍法獲得轉基因小麥的報道與日俱增，已經成為迄今為止小麥基因轉導的主要方法。值得一提的是，以小麥胚頂端分生組織、營養體頂端分生組織和花序分生組織為目標，用「手持式」基因槍射擊也獲得外源基因的瞬時表達和轉基因植株。這一方法能繞過全能性細胞數量的問題，在小麥基因轉導上具有一定的潛力。
1．2用花粉管通道法獲得的轉基因小麥 利用花粉管通道法轉導小麥的工作主要集中在前5年（1990-1995），而且主要集中在我國。周文麟等報道，將C4作物的DNA通過花粉管導入春小麥，獲得具有C4若乾性狀的轉「基因」小麥及其後代。成卓敏等稱獲得轉小麥黃矮病毒CP基因的小麥，曾君祉等劉根齊等也報道了花粉管通道法轉基因小麥的獲得。遺憾的是，當時這些報道都缺乏外源基因（或DNA）在轉基因小麥植株及其後代中整全和表達的分子生物學證據。最近，Zeng（曾君祉）和Wu等對1990-1994期間通過花粉管通道法獲得的轉基因小麥的後代進行了外源「基因」表達的分析，包括分子生物學方法的分析，證明了外源基因的整合和表達，從而證明通過花粉管通道法可以獲得轉基因小麥。周文麟、倪建福等（個人通信）用我們構建的eMS/Bar嵌合基因轉導小麥，獲得具有除草劑抗性和雄性不育性狀的植株，其後代仍然表現出對除草劑的抗性。花粉管通道法避免了復雜的組織培養、植株再生過程，在小麥上是很有潛力的基因轉導方法。
1．3其它直接法獲得的轉基因小麥 其它直接法，如顯微注射、激光微束穿刺、PEG介導和電激等對小麥的轉化近乎無效。盡管已經有眾多的研究證明外源基因在用這些直接法處理後的原生質體和細胞中能瞬時表達乃至能在產生的愈傷組織中的穩定表達，但獲得轉基因小麥植株的報道僅有一例。He等以品種「Hartog」的原生質體為受體，通過電激法獲得具有除草劑（PPT）抗性的綠色轉基因植株，但這些植株未能結籽。小麥原生質體或單細胞植株再生的困難可能是電激法、PEG法和顯微注射法等直接法在小麥轉基因上失敗的主要原因。正是由於這些困難，使以原生質體或單細胞為受體的直接法在小麥基因轉導上的前景變得十分黯淡。
1．4農桿菌介導法獲得的轉基因小麥 自1983年第一株農桿菌（Agrobacterium tumefaciens）介導的轉基因植株問世一來，農桿菌介導法很快就成為雙子葉植物基因轉導的主導方法。這一方法操作容易、成本低、轉化效率高、單拷貝基因整合率高而且外源基因在轉基因植株後代中比較穩定。能否將這一方法引入包括小麥在內的單子葉植物的基因轉導成為90年代前後討論與研究的熱點。當時，一種傾向性的觀點是認為單子葉植物不是農桿菌的天然寄主，利用農桿菌介導轉化單子葉植物幾乎不可能或沒有可能性。這種觀點的代表人物是曾在小麥等禾穀類作物組織培養與基因槍轉導方面卓有建樹的瑞士科學家Potrykus，他在國際權威雜志「Bio/Technology」和「Nature」都發表了他的悲觀論點。農桿菌介導的石刁柏轉基因植株的獲得，特別是農桿菌介導的轉基因水稻和轉基因玉米的獲得，不僅改變了單子葉植物不是農桿菌的天然寄主的看法，而且證明農桿菌介導法完全可以用於禾穀類作物的遺傳轉化。
在小麥上，雖然有人早在1988年就證明農桿菌能侵染並進行遺傳轉化，隨後又有人證明農桿菌能附著到經部分酶解和未酶解的小麥幼胚細胞，但多年來一直沒有得到轉基因植株。Hess等報道，直接將農桿菌接種到小穗獲得具有抗生素性和經Southern Blot雜交證明的轉基因當代植株，外源基因部分在F1和F2中卻未能檢測到外源基因的存在。在人工授粉後再用攜帶有共合載體（pCV2260和pSIR42）的農桿菌（株系C158）處理雌蕊，Pukhal』skii獲得經過PCR和Southern Blot雜交證明的F1植株，並由此獲得具有外源基因的F2植株。這種簡單的基因轉化方法，結合了花粉通道與農桿菌侵染的優勢，如果能夠被其它實驗室所證實，將在小麥等的基因轉化上發揮主導作用。
在農桿菌介導小麥基因轉導方面，Cheng等於1997打破了十幾年的沉默，首次獲得的正常的轉基因小麥植株。2年後，我國科學工作者夏光敏等報道獲得農桿菌介導的轉基因小麥植株，筆者的研究組也同樣成功地獲得農桿菌介導的轉基因小麥植株(待發表)。這種成功意味著，小麥也能象雙子葉植物一樣享受農桿菌介導基因轉化的所有優點。
結合農桿菌介導與基因槍法的「Agrolistic」法，或通過微彈造成的微孔來幫助農桿菌附著及其所含質粒向受體細胞的轉移，或把分別攜帶有 VirDl、VirD2和T-DNA的邊界序列加外源片段的三個質粒導入受體，通過VirDl和VirD2在受體中的正常表達促使外源目標片段採用T-DNA邊界序列以較低的拷貝數插入受體的基因組中，已經在小麥的基因轉化上嶄露頭角。超聲波輔助的農桿菌介導法(Sonication-assisted Agrobacterium-mediated transformation ，SAAT)通過超聲波在受體細胞上產生的微孔來幫助農桿菌附著及其所含質粒向受體細胞的轉移，使外源基因在小麥受體細胞的瞬時表達強度相對純農桿菌法增加至少100倍。Singh和Chawla和Serik等還利用碳化硅纖維(silicon carbide fibeers)來輔助農桿菌轉基因。此外，還有結合農桿菌與病毒的「Agroinfection 」法等。這些方法目前雖然還不成熟，但在小麥基因轉導方面具有很大的潛力。

2、小麥基因轉化的受體

作為基因轉化的受體取決於所用的轉基因方法，而受體操作的難易程度又決定了轉基因方法的成敗。
小麥胚性懸浮細胞及其分離出的原生質體多用作電激法、PEG法和顯微注射法等直接轉基因法的受體。正是由於原生質體和懸浮細胞再生植株的困難，使電激法等直接法在小麥的基因轉化方面沒有多少「用武之地」。小麥的胚性愈傷組織，特別是幼胚及其愈傷組織和幼胚盾片及其愈傷組織具有較強的植株再生能力 (有人認為它們具有較大比例的全能性細胞)，無論作為基因槍法的受體還是作為農桿菌介導法的受體都能再生出轉基因植株，從而成為迄今為止小麥基因轉化的主要受體，同時也使基因槍法成為目前小麥的主要轉基因方法，也有可能使農桿菌介導法成為今後小麥基因轉化的主要方法。筆者研究組近年的實驗結果 (待發表)表明，小麥花葯愈傷組織的再生能力很強，經基因槍轟擊後比較容易獲得轉基因植株，因而也是小麥轉基因的良好受體。小麥的各種分生組織作為「手持式」基因槍的受體具有較大的利用潛力，但這一潛力的發揮還有待這種基因槍本身的完善和經濟可利用性。雌蕊，作為花粉管通道法及農桿菌一花粉通道法的唯一受體，隨著這些轉基因方法的完善將在小麥轉基因方面發揮越來越重要的作用，有可能發揮主導作用。小孢子、花粉、大孢子和葉基作為小麥轉基因的受體可能得到進一步的開發，但在不久的將來，不可能成為主要受體。幼穗可能是進行小麥基因轉化一個很好的受體。陳梁鴻在比較幼穗和幼胚為受體的轉化試驗中觀察到，幼穗的轉化效果優於幼胚。

3、小麥基因轉化的目標基因和選擇

標志基因到目前為止，在雙子葉植物基因轉化中常用的選擇基因和報告基因仍然多作為小麥遺傳轉化的目標基因兼選擇基因，這些基因主要有報告基因類的GUS、CAT和LUC;抗抗生素類的NptII、Hpt和抗除草劑類的Bar、EPSPs、Bxn、CP4和GOX。這些基因在小麥上利用主要是為了建立有效的遺傳轉化系統。隨著小麥遺傳轉化體系的建立和完善，旨在改良小麥性狀的真正的目標基因的利用不斷增多。迄今為止，已經導入小麥並在轉基因植株中得到表達的目標基因主要有：①改良小麥加工品質方面的基因：高分子量谷蛋白亞基(HMW Glutenin subunit)基因lAxl、lDx5和lDxl0和重組高分子量谷蛋白亞基基因。②抗病基因：病毒外殼蛋白基因(Coat protein genes，CP)、類萌芽素蛋白(germin-like proteins，GLPs)基因、水稻thaumatin-like 蛋白基因TLP、藜蘆醇合成酶(stilbene synthase )基因、大麥種子核糖滯活蛋白（ribosom-inactivating protein，RIP）基因和玉米Ds轉座子; ③嵌合雄性不育類基因：核糖核酸酶類基因Barnase、細胞骨架蛋白基因等;④抗除草劑類基因：Bar、EPSPs、Bxn、CP4和GOX。
在雙子葉植物上廣泛作為選擇基因的抗抗生素類基因，如NptII和Hpt等，在小麥轉基因上應用較少。其主要原因有兩個:第一是小麥對Kan具有較高的天然抗性，第二是,人們對小麥含抗生素基因的安全性的憂慮。到目前為止，在轉基因小麥中應用得最多的選擇基因是抗除草劑基因Bar。

報告基因GUS、CAT和LUC曾為小麥基因轉化體系的建立作出重大貢獻。但在小麥轉基因體系基本成熟的今天，人們已經開始尋求其它的基因以代替上述單純的報告基因或者根本不再利用報告基因。值得一提的是外觀可見報告基因(visual marker)。McCormac等和Mentewab等用花色素苷生物合成促進基因(anthocyanin biosynthesis stimulatory genes)，如Cl/Lc，作為報告基因，通過對轉化受體及其細胞的顏色來選擇轉化子。這是一種具有廣泛應用價值的報告基因。另外，合成的綠色熒光蛋白基因(SGFP-S65T)也已用於報告小麥的基因轉化。

4、外源基因在轉基因小麥中的表達與表達分析

廣泛應用於在轉基因植物中組成型表達外源基因的啟動子CaMV 35s在穀物類中的作用較弱。為了增強外源基因在轉基因小麥中的表達，人們或利用雙CaMV35s序列，或加入單子葉植物基因的插入子(如玉米Adhl基因的插入子)，或轉而利用單子葉植物基因的啟動子，如水稻的Actl基因的啟動子和玉米Ubil基因的啟動子。Actl和Ubil啟動子是目前在小麥轉基因中應用最普遍的組成型啟動子。另外，人工重組的組成型啟動子pEmuGN啟動外源基因在轉基因小麥等的表達強度比CaMV35s高至少10倍。這類重組啟動子在小麥遺傳轉化上將大有作為。
組織和/或器官特異性表達啟動子的應用在小麥轉基因上是一個巨大的進步。特別值得一提的是花葯花粉特異性啟動子的利用。De Block等以水稻花葯絨氈層特異性啟動子ca驅動核糖核酸酶基因Barnse在轉基因小麥中表達，從而在世界上創造出第一株基因工程雄性不育小麥。筆者的研究組利用煙草花葯絨氈層特異性啟動子TA29也創造出基因工程雄性不育小麥。基因工程雄性不育小麥的完善與配套，將徹底改變目前雜交小麥制種難的狀況。另外，化學誘導性啟動子在轉基因小麥上也具有巨大的應用潛力。
近年來，對外源基因在轉基因小麥上的整合、表達方式已經有一定的研究，包括分子方面的研究。一般認為，外源基因在轉基因小麥上的整合方式與所用的轉基因方法有關，但無論是用基因槍還是農桿菌介導法，低拷貝與簡單的整合仍然是占優勢的整合方式；導入基因的遺傳在大多數轉基因系法後代中呈孟德爾遺傳。Bieri等的實驗證明，與MARs(matrix-associated regions)的目標基因(RIP)在轉基因小麥的後4代仍然非常穩定，但Alvarez等觀察到在T2代有極少數植株喪失了整合的外源基因。據Uze等報道，外源基因無論以單鏈還是雙鏈，無論是以線形還是以環形，都可以整合到小麥的基因組，但線形基因的轉化效率更高。Zupan等觀察到，農桿菌VirE2蛋白能在轉基因植物細胞中協調細胞核吸取單鏈DNA。Srivastava等報道了「位點特異性重組」 (site-specific recombination)方法，他們利用這一方法成功地將4個4拷貝插入基因位點轉化成單拷貝基因。
此外，Pederson等還利用熒光原位雜交(FlSH)研究了基因槍法導入的基因在轉基因小麥染色體上定位。他們觀察到，同一品種 (Florida)的不同轉基因株系，外源基因的插入位點不同，例如，一個株系的插入點在染色體6B，而另一株系的插入點在染色體2A。這類研究的深入，將有助於了解插入基因的「位置效應」，從而更好地了解外源基因在轉基因小麥中的表達及其穩定性。

5、小麥基因轉化存在的主要問題

盡管轉基因小麥的研究近年來進展很快，但與雙子葉植物相比，甚至與同為穀物類的水稻和玉米相比，仍然有較大的差距。最明顯的差距是，轉基因雙子葉作物已經有幾十個種類的120多個品種已經用於生產實踐或已經被批准進入大田實驗，轉基因水稻和玉米有若干品種也已經用於生產實踐，而轉基因小麥基本還處在建立和優化轉基因體系階段。筆者認為，造成這種差異的主要原因或在小麥轉基因方面存在如下的問題：
第一，也是最主要的，小麥組織培養技術問題。小麥組織培養中植株再生率低和基因型依賴性很強的問題是限制轉基因成功及大幅度提高轉基因小麥數量的瓶頸。植株再生性強的小麥品種，如Bobwhite等，無論用基因槍法還是農桿菌法都己經得到轉基因植株，而再生性差的品種則用基因槍也無法得到轉基因植株。也正是由於品種的再生問題，使全世界的轉基因小麥都集中在少數幾個基因型，而這些基因型又並非生產實踐所需要的或在生產實踐中的應用很有限。
第二，基因轉化的受體比較單一。未成熟胚及其衍生物是小麥轉基因的主導受體，而在世界發展中國家，有條件周年提供小麥未成熟胚者寥寥無幾。
第三，過份依獺基因槍法。目前轉基因小麥90%以上是用基因槍法獲得的，而基因槍法轉基因的缺點在雙子葉植物上已經表現得很明顯，在此毋須多言。其實，這兩個原因在本質上是由第一個原因所引起的。另外，基因槍昂貴的價格也是附帶因素。
第四，對農桿菌轉化單子葉植物，特別是轉化小麥的機理缺乏系統而深入的研究。目前人們已經認識到，不同種類的農桿菌對同一種單子葉植物的侵染能力不同，甚至同一菌株在不同的培養條件下侵染能力也有明顯差異。而包括小麥在內的一些單子葉植物本身也存在著一些不利於農桿菌侵染的因素，如，細胞壁的果膠多糖的高度酯化而缺乏農桿菌的附著位點;分泌的愈傷誘導物少或缺乏或與雙子葉植物存在明顯的差異，不利於農桿菌的轉化等。正是由於這些了解，人們通過選用適宜的農桿菌菌株和植物表達載體、提高侵染時農桿菌的濃度和延長侵染時間、在共培養時加入vir基因活化劑 (如AS，OH-AS，雙子葉植物傷流等)以及選用合適的受體基因型、外植體和培養基等，使農桿菌轉化小麥有了重大突破，成功地獲得轉基因植株。
第五，小麥本身為異源6倍體，基因組較大而復雜，導入的外源基因的沉默與修飾更為嚴重。
第六，對轉基因小麥分子生物學證據作用的過分依賴。這在某中意義上曾扼制了極有優勢的花粉管通道法在小麥轉基因上的應用。

6、轉基因小麥的展望

隨著小麥多種基因轉化體系的建立或初步建立，小麥的轉基因研究的進展在今後5年將會更快。但這種進展將以更高效的植株再生體系的建立和完善為基礎。以基因槍為主體的轉基因研究將轉向以農桿菌介導法為主體轉基因研究，這一研究將會優化或完善農桿菌介導的小麥轉基因體系。同時，基因槍法轉化小麥將從研究階段進入應用階段，因而將有少量轉基因小麥品系或品種進入大田試驗或作為品系、品種釋放。花粉管通道法，特別是它與農桿菌結合的方法將被人們普遍接受並廣泛用於小麥轉基因的實踐。各種輔助農桿菌介導的方法將走向成熟。抗抗生素基因作為選擇基因將基本在小麥轉基因上消失，代之而來的將是不同的抗除草劑基因、不同糖類和激素類基因。明顯易見而又對小麥有益的報告基因，如花色素基因等將會得到較普遍的應用，因而轉化子的選擇效率將大為提高。更多的優良農業性狀基因將被導入和表達，特別是提高麵粉，營養價值、改良麵粉加工性狀的品質基因、提高植株抗病性的基因、提高植株抗旱性的基因和促進植株氮的有效利用基因。更高強度的啟動子和組織、器官特異性啟動子將會被普遍利用，化學劑可調控啟動子也將在部分先進的實驗室利用，象 「位點特異性重組」等單拷貝插入技術將更加完善並得到應用。基因工程雄性不育體系將會得到完善，並初步用於雜交種子的生產。抗除草劑基因也將用於控制雜種的純度。另外，對外源基因的插入位點和插入方式將有比較清楚的了解，從而對外源基因的表達與沉默將有更清楚的了解。同時，反義基因技術將初步用於對小麥功能基因的研究。
或
一、植物的遺傳轉化

20世紀70年代末80年代初，人們用野生型Ri和Ti質粒轉化煙草和馬鈴薯細胞獲得再生植株後，以Ti質粒為載體的植物遺傳轉化技術隨之被建立。近年來植物的遺傳轉化技術得到了迅速發展，建立了多種轉化系統。按照基因引入受體植物細胞的方法，植物遺傳轉化技術大體可分為兩類：以載體為媒介的基因轉移和基因或DNA的直接轉移。所謂以載體為媒介的基因轉移就是將目的基因連於某一載體DNA上，然後通過寄主感染受體植物等途徑將外源基因轉入植物細胞的技術。DNA的直接轉移是指利用植物細胞生物學特性，通過物理、化學和生物學方法將外源基因轉入植物細胞的技術。

（一）載體法轉化 農桿菌介導的轉化是最主要的一種載體轉化方法。利用經過改造的農桿菌Ti質粒為載體可以高效地轉移外源基因。所獲得的轉化植物有兩種基本方法：一種是1979年Marton等以植物原生質為受體的共培養法（ocultivation）；一種是1985年Horsch等人建立的葉盤法（leaf disc cocultivation）。

共培養法是把農桿菌與植物原生質體共同培養以實現轉化的方法。其程序包括農桿菌對初生細胞壁的原生質體的轉化、轉化細胞的篩選和誘導轉化細胞分化並再生植株。

葉盤法實際上是對共培養法加以改進後而創立的一種轉化方法。用農桿菌感染葉片外植體並短期共培養。在培養過程中，農桿菌的vir基因被誘導，它的活化可以啟動T-DNA向植物細胞的轉移。共培養後，也要進行轉化的外植體的篩選、愈傷組織的培養、誘導分化等步驟，以得到再生植株。葉盤法由於不需進行原生質體操作等，方法簡單，獲得轉化植株也更快，是用植物外植體為材料進行轉基因的一個良好途徑。

農桿菌介導的遺傳轉化是大多數雙子葉植物轉化中常採用的方法，但由於農桿菌具有宿主局限性，極少能感染單子葉植物，特別是一些重要的農作物如水稻、小麥、玉米等對農桿菌不敏感，難於應用此法進行遺傳轉化。

除上述以Ti質粒為載體的基因轉化外，還可以用脂質體（liposome）為載體進行遺傳轉化。脂質體是由磷脂組成的膜狀結構，因此可將DNA分子包裝在脂質體內以避免受體細胞DNase的降解，把DNA分子導入到植物的原生質體中去。

（二）基因直接轉移的方法 這是指既不依賴於農桿菌，也不依賴其他載體或媒介的一些基因轉移方法。

1．電激和電注射法 電脈沖能改變細胞膜的透性。通過高壓電脈沖的電激穿孔作用把外源DNA引入植物原生質體的方法就稱為電激法（electroporation）。這種方法現已較廣泛地應用於單子葉和雙子葉植物以及動物的基因轉移，如20世紀80年代末用此法將新黴素磷酸轉移酶（NPT Ⅱ）基因轉入玉米自交系的原生質體，已再生成植株。

通過電激技術把基因直接引入完整的植物細胞或組織的方法，稱作電注射（electroinjection）。這種方法可避免原生質體培養和再生成植株的繁雜操作與困難，因而具有巨大的應用潛力。

2．基因槍法 基因槍法又稱粒子轟擊技術（particle bombardment）。這一方法是用粒子槍把表面吸附有外源DNA的金屬微粒高速地射進植物細胞或組織。由於此法快速簡便，不受宿主范圍限制，而受體植物細胞不需去除細胞壁，轉化率又高，被轉化的細胞或組織容易再生成植株，因而頗受關注。

3．微注射法 微注射法（microinjection）是利用顯微注射儀等，通過機械的方法將外源基因或DNA直接注入細胞核或細胞質。與其他方法相比，這個方法對外源遺傳物質的導入更為直接和有效。

微注射法除用於植物細胞外，近些年還發展到用於直接注射植物子房，這樣更有利於外源遺傳物質對幼胚的轉化。這方面的工作我國於20世紀70年代即已進行了理論與實踐的探索，並已獲得抗枯萎病的棉花轉化植株抗蟲棉等。

二、轉基因動物技術及其應用

（一）轉基因動物的概念 藉助基因工程技術把外源目的基因導入生殖細胞、胚胎幹細胞和早期胚胎，並在受體染色體上穩定整合，使之經過各種發育途徑得到能把外源目的基因傳給子代的個體，即轉基因動物（transgenic animal）。轉入的目的基因稱為轉基因（transgene），這種轉移目的基因的過程稱為轉基因作用（transgenesis）。關於「轉基因」的概念，通常只限於動、植物中經基因工程技術進行的基因轉移，因此品種間不論有性或無性雜交獲得新基因的途徑都不屬此范疇。

（二）轉基因動物技術 轉基因動物技術是20世紀80年代初發展起來的一項生物技術，它克服了物種之間的生殖隔離，實現了動物物種之間遺傳物質的交換和重組。根據外源基因導入的方法和對象的不同，至今主要有3種途徑可以產生轉基因動物，即顯微注射法、反轉錄病毒法和胚胎幹細胞法。反轉錄病毒轉移基因的基本方法在前面已有簡介，這里只介紹顯微注射法和胚胎幹細胞法兩種。

1．受精卵原核顯微注射法 顯微注射技術是從動物胚胎學研究移核實驗的基礎上發展而來。20世紀80年代初期人們利用這一方法向動物生殖細胞轉移外源基因，成功地建立了轉基因小鼠。1985年轉基因綿羊和轉基因豬問世，以後轉基因大鼠、兔、雞、牛、魚等都已陸續取得成功，可見顯微注射法是迄今應用得較為普遍而又最有成效的一種獲得轉基因動物的技術。

本方法是在顯微鏡下，用直徑約為1μm的玻璃管直接插入受精卵的雄原核內，將毛細管內所帶有的外源基因的DNA注入原核，然後將其移植到假孕母體輸卵管或子宮內並發育成子代個體。為了解轉基因的整合情況，可酌情應用斑點雜交、多聚酶鏈式反應或Southern印跡雜交等方法對子代個體DNA進行檢測。

顯微注射法的優點是導入的外源基因片段可長達50 kb，且無需載體，外源基因在宿主染色體上的整合率相對較高。其不足之處是外源基因的整合是隨機的，因而難以控制其整合率；再者，對外源基因能否穩定整合於受體基因組的檢測，必須等到子一代個體出生後經過選擇才能確定，不利於在生育期長、產仔少的大家畜中應用。

2．胚胎幹細胞介導法 胚胎幹細胞（embryonic stem cell，ES）是指從哺乳動物胚胎囊胚期內的細胞團中分離出來的尚未分化的胚胎細胞，這種細胞具有發育的多能性，能夠分化出各種組織。20世紀80年代中期人們開始研究利用ES細胞獲得轉基因動物的方法。這個途徑是將外源基因直接導入ES細胞，經體外培養篩選後再注入到受體囊胚腔中，與其中的囊胚細胞聚集在一起，成為受體胚胎的一部分，參與其分化。由這種胚胎發育而成嵌合體的轉基因動物，即其中有一部分組織來源於整合有外源基因的供體ES細胞。在嵌合過程中，被轉化的ES細胞分化而成的生殖細胞可通過雜交將引入的外源基因傳遞下去。

在以胚胎幹細胞為媒介獲得轉基因動物的技術中，既可以用多種方法將外源基因導入ES細胞，且細胞的鑒定、篩選比較方便，又可預先在細胞水平上測定外源基因的拷貝數、定位和表達的水平以及插入的穩定性等，而且將ES細胞注入囊胚的操作較易進行，整合率相對較高。只是建立ES細胞系本身就是一項難度極高的工作，目前小鼠ES細胞系雖已建立，但在豬、羊中還未能得到真正穩定的ES細胞株。

（三）轉基因動物的應用 轉基因動物的研究內容非常廣泛，20世紀80～90年代以來從基礎理論到應用技術在深度和廣度上都有了很大發展，並已日漸由實驗室走向生產實踐。

1．在基因表達調控研究方面的應用 利用轉基因動物可作為在體內研究外源基因表達調控的「反應器」，下面僅就DNA順式調控元件和基因在發育中的時空調節為例予以介紹。

（1）順式調控元件的研究 異常的脂蛋白水平與動脈粥樣硬化等疾病有關。人類有5種脂蛋白，各自含有不同的載脂蛋白。現已發現約有17種載脂蛋白，它們的編碼基因已測序，是用於研究心血管疾病的候選基因。把載脂蛋白基因轉入小鼠，可用來研究人脂蛋白代謝、調控以及動脈粥樣硬化。在研究載脂蛋白基因組織特異性表達的順式調控元件時，發現有兩簇載脂蛋白基因凋節的組織特異性表達（圖19-15）。一簇包括A－Ⅰ、C-Ⅲ和 A-Ⅳ基因，定位於人11號染色體長臂2區3帶（11q23），是按A－Ⅰ、C－Ⅲ、A－Ⅳ的順序組成。C－Ⅲ的轉錄方向與其他兩個基因相反。 A-Ⅰ和C-Ⅲ主要在肝和小腸中表達，A-Ⅳ主要在小腸表達。在 C-Ⅲ基因的-0.2～-1.4bp之間是調節 A－Ⅰ基因在小腸中表達的區域。這個區域也是 C－Ⅲ和A－Ⅳ基因在小腸表達的凋控元件，表明這一元件可以調節整個載脂蛋白基因簇在小腸的表達。另一基因簇定位於19號染色體長臂1區3帶（19q13），包含有E、C－Ⅰ和C-Ⅱ基因，它們按E、C－Ⅰ、C－Ⅱ順序排列。E基因主要在肝臟和大部分身體組織中表達，但表達水平低。以後發現在C－Ⅰ基因和C－Ⅱ基因之間有

❷ 怎麼快速去蝴蝶斑

四大步驟讓你徹底告別黃褐斑
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中醫認識
中醫學認為，肝藏血，喜條達而惡抑鬱，若情志不遂，肝失條達，或陰血暗耗，或生化之源不足，均可導致肝氣郁結不舒。郁久化熱，灼傷陰血，致使顏面氣血失和而發病。
腎藏精、為水，水虧則火旺，津血暗耗，不能濡潤於顏面，而枯萎發斑，脾虛不能健運，氣虛生化乏源，以致氣血不足，不能上榮於面，發生黃褐斑。
黃褐斑患者常伴有急躁易怒，胸脅脹痛，痛經或經期延後，經血紫暗有塊，舌有紫斑，脈弦澀 （面斑呈青褐色），臨床常見眩暈、耳鳴、健忘、失眠、咽干口燥、五心煩熱，有的顴紅盜汗，女子經少，男子遺精等肝腎陰虛的症狀。
中醫治療黃褐斑：中醫認為黃褐斑多由久病失調，房事不節，產育過多，情志內傷引起。
具有內調作用的代表中葯有：藏紅花、赤芍、雲苓、血竭、丹皮 、熟地、 白芍、枳殼 、香附 、鬱金 、旱蓮草等。
中醫治療黃褐斑外治法
主要是採用中葯面膜治療。具體方法為先潔面，磨砂去死皮，按摩10～15分鍾，然後將中葯面膜（內含赤芍、丹參 、桃仁、紅花、白芨、僵蠶、白丁香等活血化瘀、增白祛斑葯物）加乳劑基質配成霜劑敷於面部5分鍾，再上石膏粉成熱膜敷面部30分鍾。然後去膜，清洗面部。也可選擇具有色素還原作用的維生素c針劑或3%白降汞軟膏塗擦患處。
中醫花粉治療黃褐斑
黃褐斑又稱肝斑、蝴蝶斑，黃褐斑是與內分泌失調有關。一般習慣把它分為三類：因妊娠、卵巢機能病變、精神情緒改變、慢性肝膽疾病等與內分泌機能有關的斑塊
金相伴花花粉含有80餘種活性酶和多種有機酸、抗體素和多種黃酮類化合物，還含有十多種維生素而且成分搭配恰當。科學實驗還發現花粉能使體內SOD(超氧化岐化酶）含量升高這些都是人體中不可缺少的，而且絕大多數都能被人體消化吸收，這些物質能有效地調治內分泌紊亂、抑制黑色素的分泌，並促使表面黑色素的代謝，營養顏容，能有效祛除黃斑。
據日本報道，用花粉給中老年婦女使用6個月，可令老年斑消退50%，雀斑消退73%，表皮黑色消退60%。

食療
湯湯水水，輕松祛斑
在天然食品中，具有保養皮膚和消除黃褐斑功效的食物有許多種。現介紹幾種經臨床驗證確有實效的食療方法。
1、綠豆百合美白湯：將綠豆、赤小豆、百合洗凈，用適量清水浸泡半小時。大火煮滾後，改以小火煮到豆熟。依個人喜好，加鹽或糖調味皆可。綠豆與百合所含的維生素能使黑色素還原，具有漂白作用。
2、絲瓜化瘀茶：絲瓜絡15克、茯苓20克、僵蠶5克、白菊花10克、玫瑰花5朵、紅棗5枚。將上述材料加水煎取汁，代茶飲服。葯渣可再煎取汁溫敷於臉部。該茶飲清熱祛風消滯，適宜氣滯血瘀之人。
3、檸檬冰糖汁：將檸檬榨汁，加冰糖適量，飲用。檸檬中含有豐富的維生素C，100克檸檬汁中所含維生素C可高達50毫克。此外，還含有鈣、磷、鐵和B族維生素等。常飲檸檬汁不僅可以白嫩皮膚，防止皮膚血管老化，消除面部色素斑，而且還具有防治動脈硬化的作用。
4、牛奶核桃飲：牛奶、豆漿、黑芝麻各200克，核桃300克。將核桃、芝麻放入小石磨中；牛奶和豆漿混勻，慢慢倒入小石磨中邊倒邊磨，磨好後倒入鍋內煮沸，後加入少量白糖調味，也可在煮沸時，打入生雞蛋，邊攪邊煮。每日1次，每次1小碗。可經常食用。
耳穴刺血
(一)取穴
主穴：熱穴、癤腫穴、皮質下。
配穴：內分泌、脾、胃。
熱穴位置：與對耳輪上腳內側緣同一直線的對耳輪部。
癤腫穴位置：位於耳後上部。
(二)治法
採用耳穴刺血之法。以主穴為主，再根據全身症狀用配穴。令患者端坐，常規作穴位消毒，用眼科 15號小手術刀片或三棱針， 刺破表皮0.1厘米，出血後以75％酒精棉球3個，擠干後連續拭凈血跡。再用消毒干棉球壓蓋刺孔，防止感染。每次只刺一穴，隔日刺血1次，穴位交替使用，15次為一療程，療程結束後進行復查，如不愈者則可繼續治療2～3個療程，療程間可休息7～10天。施術前應向病人說明治療方法，以取得患者合作。在用75％酒精棉球拭耳血時要輕輕活動外耳輪，避免用力擠捏，造成出血不暢。刺孔敷蓋的干棉球囑患者要保持24小時不脫落，此期間避免著水，遇有刺孔癒合欠佳者，避免重復在原處刺血，防止感染或延誤癒合。
(三)療效評價
共治283例，共痊癒165例，顯效52例，有效24例，無效42例，有效率為85.2％[1]。
耳穴壓丸
(一)取穴
主穴：面頰、子宮、內分泌、皮質下。
配穴：肺、腎、肝、脾、大腸、外鼻。
(二)治法
採用耳穴敷貼之法。先以耳穴探測儀找到穴區敏感點，每次主穴必貼，配穴根據症情酌加。用王不留行子或磁珠(強度為380高斯)作為壓物，置於0.7×0.7平方厘米的小方膠布上，敷貼於敏感點。即予按壓2～3分鍾，使耳廓潮紅發熱。每日自行按壓 3～4次。每次敷貼一側耳，隔日換貼1次，15次為一療程，兩耳輸換交替貼敷。一般需三個療程。

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❸ 黃褐斑的治療

中醫認識
中醫學認為，肝藏血，喜條達而惡抑鬱，若情志不遂，肝失條達，或陰血暗耗，或生化之源不足，均可導致肝氣郁結不舒。郁久化熱，灼傷陰血，致使顏面氣血失和而發病。 腎藏精、為水，水虧則火旺，津血暗耗，不能濡潤於顏面，而枯萎發斑，脾虛不能健運，氣虛生化乏源，以致氣血不足，不能上榮於面，發生黃褐斑。 黃褐斑患者常伴有急躁易怒，胸脅脹痛，痛經或經期延後，經血紫暗有塊，舌有紫斑，脈弦澀 （面斑呈青褐色），臨床常見眩暈、耳鳴、健忘、失眠、咽干口燥、五心煩熱，有的顴紅盜汗，女子經少，男子遺精等肝腎陰虛的症狀。 中醫治療黃褐斑：中醫認為黃褐斑多由久病失調，房事不節，產育過多，情志內傷引起。 具有內調作用的代表中葯有：藏紅花、赤芍、雲苓、血竭、丹皮 、熟地、 白芍、枳殼 、香附 、鬱金 、旱蓮草等。
中醫治療黃褐斑外治法
主要是採用中葯面膜治療。具體方法為先潔面，磨砂去死皮，按摩10～15分鍾，然後將中葯面膜（內含赤芍、丹參、桃仁、紅花、白芨、僵蠶、白丁香等活血化瘀、增白祛斑葯物）加乳劑基質配成霜劑敷於面部5分鍾，再上石膏粉成熱膜敷面部30分鍾。然後去膜，清洗面部。也可選擇具有色素還原作用的維生素c針劑或3%白降汞軟膏塗擦患處。 中醫花粉治療黃褐斑 黃褐斑又稱肝斑、蝴蝶斑，黃褐斑是與內分泌失調有關。一般習慣把它分為三類：因妊娠、卵巢機能病變、精神情緒改變、慢性肝膽疾病等與內分泌機能有關的斑塊 金相伴花花粉含有80餘種活性酶和多種有機酸、抗體素和多種黃酮類化合物，還含有十多種維生素而且成分搭配恰當。科學實驗還發現花粉能使體內SOD(超氧化岐化酶）含量升高這些都是人體中不可缺少的，而且絕大多數都能被人體消化吸收，這些物質能有效地調治內分泌紊亂、抑制黑色素的分泌，並促使表面黑色素的代謝，營養顏容，能有效祛除黃斑。 據日本報道，用花粉給中老年婦女使用6個月，可令老年斑消退50%，雀斑消退73%，表皮黑色消退60%。
黃褐斑治療其它方法局部用葯治療
黃褐斑是常見發生於面部的一種難治性色素沉澱和增加性皮膚病。與遺傳、內分泌、妊娠、日光等有關，近來發現本病發生與微生態平衡、代謝異常及劣質化妝品有關。目前無特殊治療方法，外用去色素或脫色素制劑是治療表皮中黑色素增加最有效的方法。但只能控制，不能對黃褐斑進行根除。常用的局部外用葯列舉以下幾種。 1、氫醌 與酪氨酸酶的底物酪氨酸結構相似，可以競爭性抑制酪氨酸酶的活性，影響黑素的形成。氫醌的作用機制還包括抑制DNA和RNA復合體，剝蝕黑素小體和破壞黑素細胞，從而促進黑素小體的分解。氫醌的療效與它的濃度、基質和產品的化學穩定性有關，濃度越高，治療效果越好，刺激性也越大，常用的濃度是2%～5%。氫醌常用方法是2次/d外用，一般用葯4周可見皮膚顏色變淺，6周～10周取得最佳療效。如果日間聯合應用廣譜防曬霜可以提高氫醌的療效。然而長期使用濃度為4%～5%的氫醌可引起原發刺激反應、接觸性皮炎和炎症後色素沉著，另外還有引起外源性褐黃病和膚色變深的可能。2%氫醌配伍0.05%或0.1%維A酸或羥基乙酸治療有滿意療效，後者可抑制氫醌氧化，從而提高其表皮穿透作用，促進色素排除，並使角質細胞增生。真皮黃褐斑用氫醌治療療效不佳。短期應用皮質類固醇激素可以減少氫醌的刺激作用、降低細胞的新陳代謝抑制黑素復合體。 2、壬二酸 是從卵圓形糠秕孢子菌培養液中分離出的天然直鏈飽和二羥基酸。壬二酸競爭性抑制酪氨酸酶，直接干擾黑素生物合成，並對黑素細胞的超微結構有損傷，因此能成功地治療黃褐斑。其對黃褐斑治療效果優於氫醌霜。壬二酸對表皮型和混合型黃褐斑（表皮和真皮同時受累）都有效，常用20%壬二酸霜局部外擦。壬二酸副作用小，濃度在15%～20%時是人們可以耐受的，過敏反應和光毒反應很少發生，不良反應包括瘙癢、輕度的暫時性紅斑、鱗屑和灼熱感，這些不良反應症狀通常2周~4周可以消退且沒有系統損害。 3、維A酸 維A酸可以減輕光老化引起的色素沉著斑，並可以抑制酪氨酸的合成，從而抑制黑素的生成。臨床多用0.1%維甲酸霜外用，每日2次，起效時間約為24周，副作用表現紅斑脫屑，部分發生接觸性皮炎，但這種不良反應不影響治療效果，且在繼續治療的過程中逐漸消失。 4、曲酸（5羥基2羥甲基吡喃酮） 曲酸是酪氨酸酶活性抑制劑，抑制培養色素細胞生成黑素。但是，曲酸有顯著的潛在致敏性，已發現使用含曲酸制劑的患者發生接觸性皮炎的比例很高。 5、酚硫醚 如4S半胱胺酚代表了一類新的與酚有關的脫色素化合物,這些黑素細胞毒性制劑是源於硫磺類似酚的化合物,產物有半胱胺醯酚和半胱胺酚。N乙醯4S半胱胺酸酚對黃褐斑有較好的療效，且比氫醌刺激性小，性質穩定。它是酪氨酸酶的底物，隨著酪氨酸酶的活化，它形成一個黑色素的類似物，主要能有效抑制黑素細胞合成黑色素。用4%的N乙醯基4S半胱胺酚治療黃褐斑，經過2周～4周的局部治療可取得顯著效果。N丙醯4S半胱胺酚是N丙醯的一個新的衍生物，這種化合物也是酪氨酸酶的底物，與N乙醯基相比，是一種效能更高的黑素細胞中毒劑。酚硫醚同時具有抑制黑素細胞生長繁殖和殺傷黑素細胞的作用。 6、祛斑素 是中葯山茱萸的主要成分，祛斑素對酪氨酸酶及黑素的產生有抑製作用，其抑製程度與濃度有關，濃度越高作用越強。 7、化學剝脫劑外用制劑 雷瑣辛：雷瑣辛是兒茶酚的同質異構體，是早期應用於化學剝脫劑的葯物之一。濃度為50%的雷瑣辛可用於中、深層剝脫，治療黃褐斑合並雀斑和日光性著色斑亦有效。羥乙酸：羥乙酸化學剝脫劑代表了一類安全有效的治療面部色素沉著的方法，它已較廣泛地用於治療黃褐斑。用10%～15%的羥乙酸洗劑加2%氫醌可增強療效。曲酸：當曲酸凝膠治療黃褐斑無效時，可用曲酸化學剝脫劑,它由2%曲酸與3種羥基酸（水楊酸、檸檬酸、乳酸）組成。使用曲酸化學剝脫劑後發生皮膚乾燥現象比羥基乙酸化學剝脫劑少。羥乙酸聯合曲酸或羥乙酸聯合氫醌治療黃褐斑的色素沉著都有很好的療效。缺點是曲酸制劑的刺激性比氫醌大。三氯乙酸：三氯乙酸為中深層剝脫劑的一個輔助用葯，可用於治療泛發性及持續性的黃褐斑。水楊酸：水楊酸化學剝脫劑也可治療黃褐斑的色素沉著，其濃度為10%～20%，間斷使用2周。
食療
湯湯水水，輕松祛斑 在天然食品中，具有保養皮膚和消除黃褐斑功效的食物有許多種。現介紹幾種經臨床驗證確有實效的食療方法。 1、綠豆百合美白湯：將綠豆、赤小豆、百合洗凈，用適量清水浸泡半小時。大火煮滾後，改以小火煮到豆熟。依個人喜好，加鹽或糖調味皆可。綠豆與百合所含的維生素能使黑色素還原，具有漂白作用。 2、絲瓜化瘀茶：絲瓜絡15克、茯苓20克、僵蠶5克、白菊花10克、玫瑰花5朵、紅棗5枚。將上述材料加水煎取汁，代茶飲服。葯渣可再煎取汁溫敷於臉部。該茶飲清熱祛風消滯，適宜氣滯血瘀之人。 3、檸檬冰糖汁：將檸檬榨汁，加冰糖適量，飲用。檸檬中含有豐富的維生素C，100克檸檬汁中所含維生素C可高達50毫克。此外，還含有鈣、磷、鐵和B族維生素等。常飲檸檬汁不僅可以白嫩皮膚，防止皮膚血管老化，消除面部色素斑，而且還具有防治動脈硬化的作用。 4、牛奶核桃飲：牛奶、豆漿、黑芝麻各200克，核桃300克。將核桃、芝麻放入小石磨中；牛奶和豆漿混勻，慢慢倒入小石磨中邊倒邊磨，磨好後倒入鍋內煮沸，後加入少量白糖調味，也可在煮沸時，打入生雞蛋，邊攪邊煮。每日1次，每次1小碗。可經常食用。
耳穴刺血
(一)取穴 主穴：熱穴、癤腫穴、皮質下。 配穴：內分泌、脾、胃。 熱穴位置：與對耳輪上腳內側緣同一直線的對耳輪部。 癤腫穴位置：位於耳後上部。 (二)治法 採用耳穴刺血之法。以主穴為主，再根據全身症狀用配穴。令患者端坐，常規作穴位消毒，用眼科15號小手術刀片或三棱針， 刺破表皮0.1厘米，出血後以75％酒精棉球3個，擠干後連續拭凈血跡。再用消毒干棉球壓蓋刺孔，防止感染。每次只刺一穴，隔日刺血1次，穴位交替使用，15次為一療程，療程結束後進行復查，如不愈者則可繼續治療2～3個療程，療程間可休息7～10天。施術前應向病人說明治療方法，以取得患者合作。在用75％酒精棉球拭耳血時要輕輕活動外耳輪，避免用力擠捏，造成出血不暢。刺孔敷蓋的干棉球囑患者要保持24小時不脫落，此期間避免著水，遇有刺孔癒合欠佳者，避免重復在原處刺血，防止感染或延誤癒合。 (三)療效評價 共治283例，共痊癒165例，顯效52例，有效24例，無效42例，有效率為85.2％[1]。
耳穴壓丸
(一)取穴 主穴：面頰、子宮、內分泌、皮質下。 配穴：肺、腎、肝、脾、大腸、外鼻。 (二)治法 採用耳穴敷貼之法。先以耳穴探測儀找到穴區敏感點，每次主穴必貼，配穴根據症情酌加。用王不留行子或磁珠(強度為380高斯)作為壓物，置於0.7×0.7平方厘米的小方膠布上，敷貼於敏感點。即予按壓2～3分鍾，使耳廓潮紅發熱。每日自行按壓3～4次。每次敷貼一側耳，隔日換貼1次，15次為一療程，兩耳輸換交替貼敷。一般需三個療程。 (三)療效評價 以上法共治250例，結果痊癒120例，顯效98例，有效7例，無效15例，其總有效率為94.0％[2，3]。
按摩調理黃褐斑
操作方法： （1）按摩足太陽膀胱經，由足跟外上行，由上而下刺激5遍。在肝俞、腎俞、脾俞、三焦俞等穴位稍停片刻按揉之。 （2）食指指壓足小趾外束骨穴。每秒按一次，共按5～10次。 （3）在背腰中線督脈部位、由上而下推擦5遍，再以背椎為中線，用手掌分別向左右兩旁推擦10遍以上。 注意事項: （1）積極治療慢性消耗性疾病，根治發病因素。 （2）懷孕後出現黃褐斑者，一般只做面部按摩，並應多吃新鮮蔬菜和水果，或產前產後服維生素C，每日一克，有抑制色素合成的作用。 （3）保持心情舒暢，避免過多憂慮。
黃褐斑的調理及修復
色斑的形成原因很多，種類比較復雜。我們最常見的色斑是雀斑和黃褐斑。 中醫調理法 中醫治療的范圍一般以後天的黃褐斑為主，它認為「脾濕、腎虛是發病之因，氣機不暢、氣血瘀滯，顏面失於濡養而致病」。 因此，中醫將黃褐斑分為「腎虛肝瘀」和「脾虛肝瘀」兩種，針對這兩種斑點開了以下的中葯方子: 直接修復法 有觀點認為，夏季是不適宜祛斑的，因為烈日的照射會將辛苦取得的成果毀於一旦，而且祛斑過程會使皮膚本身更加脆弱，從而引起曬後更可怕的反彈。其實，這是一個比較OUT的專業誤區，因為現在不少美容院和醫院里，祛斑不僅僅是用激光或是酵素分解，而是整個中西醫結合的過程,祛斑是個整體的過程。 日常療養法 一般來說，我們可以在日常生活中養成良好的生活習慣和護膚習慣，並在皮膚科醫生的指導下選擇合適的治療方法或配合皮膚美容、中醫中葯的手段，控制斑點蔓延，將色斑的負面影響減到最小。
黃褐斑治療注意事項
一、使用激素類葯物或含激素的化妝品 含有皮質類固醇激素的外用葯品種繁多，又屬於OTC用葯，人們可以自行購買，所以誤用濫用現象比較嚴重。激素具有非特異性抗炎作用，早期還可抑制黑色素細胞分泌，因此初期塗抹時可有一定效果。但停止使用後色斑顏色會再次復發，甚至加重。有些人由於長期使用，對激素產生依賴性，形成激素依賴性皮炎，造成皮膚萎縮，角質層變薄，或毛細血管擴張等新的損害。 二、用激光祛斑、冷凍、電灼等方法去斑 黃褐斑不同於其他色素斑，它的成因非常復雜，治療應該側重於內調，不宜採用上述方法治療，否則可能破壞皮膚巰基，使色素加深，色斑范圍擴大。 三、用「果酸換膚祛斑」進行祛斑治療 我們的皮膚厚度只有0.5至4毫米，表皮則更薄，不超過0.2毫米。這不到0.2毫米的厚度包括了十多層細胞，底層細胞和表面的角質層一面生長，一面脫落，保持著皮膚的生態平衡。面部皮膚的自然更新周期約為21至28天，皮膚角質層含有10%至20%的水分，這一切對維持皮膚的潤澤，防止各種因素對皮膚的侵害起著重要的保護和防禦作用。用一些含有角質剝脫劑的葯物或化妝品頻繁地使皮膚的角質層剝脫，會破壞皮膚的自身抵抗力，防曬作用被大大削弱，加上皮膚自身為了恢復防禦功能而更多地分泌黑色素，就會使黃褐斑更加嚴重，甚至成為黑褐斑。 四、注意調節情志，保持愉快的心情，保持充足的睡眠。 而對黃褐斑的治療，除了專門針對消除斑點的治療以外，更多的還應注重內分泌的調節，美容專家指出，神經系統、內分泌系統，消化排泄系統是人體的主要三大系統，維系著人體各項功能的正常運作，這三大系統相互聯系、相互依存，一旦失調，將會誅連整體，既然黃褐斑與人體內分泌系統有直接的關系，那麼，防治黃褐斑，就應該去斑與調節內分泌兩手一起抓。

❹ 子宮肌瘤的治療方法

可以進行手術摘除手術 採用保守治療：利用合理的用葯，來抑制肌瘤的生長，但是在臨床上效果不是很少。建議大家還是採取手術治療的方法。 2、手術治療：傳統手術治療，由於切口大，創傷大，已經被逐漸的淘汰。醫院採用目前國際先進的手術，然後由資深的專家主刀，在腹腔鏡監護的同時，利用宮腔鏡子宮粘膜下肌瘤進行電切除...。這種方法具有損最低，保留生育能力，肌瘤去除干凈等特點。已經成功的使很多的肌瘤病人恢復了身體健康。專家提示：有的病人抱著僥幸的心理，不及時的處理肌瘤然後盲目的懷孕，這是很容易早期流產的，所以，對於有生育要求的女性要及時的治療的，在如今的醫療條件下，是完全可以保留子宮，保護生育能力，來切除下肌瘤的。 3、中醫療法:中醫認為子宮肌瘤因臟腑功能失調、氣滯血瘀而成。所以中醫治療子宮肌瘤，多以活血化瘀、消瘀散結、清熱解毒、疏肝理氣、化瘀止痛為主。下面我們來看看如何使用中醫方法治療子宮肌瘤。 〈4〉常吃富有營養的乾果類食物，如花生、芝麻、瓜子等。 中醫治療子宮肌瘤能改善增生的子宮內膜的血液循環，使肌層的單純性肥大逐漸消失，增生的結締組織變軟，從而起到調經、止血、疼痛消失、恢復卵巢功能的治療作用，能有效地控制子宮肌瘤瘤體生長，使瘤體逐漸軟化，最後消散。中葯在治療子宮肌瘤方面有獨特的方式，其中茜芷宮瘤貼就以黑膏葯的形式出現的，黑膏葯在中醫治療領域發揮了重要作用，是中醫治療的靈魂之一，師承內病外治之宗吳尚先理論，利用內病外治法，葯效滲透病變位置，在不傷害腎臟情況下，從而達到治療的目的，此法現已成功治癒很多女性朋友，並獲得大量好評。基本上，中醫治療子宮肌瘤以活血化淤，散結消症為主，佐以理氣行滯，扶正固本，以達到止血、消瘤、恢復元氣的目的。