丁香園背景
㈠ β1-42可以用熒光染料標記嗎 丁香園
電泳後,核酸需經染色才能顯色出帶型,常用以下核酸染色劑:1、溴化乙錠(ethidium bromide,EB)最常用的核酸熒光染料,可嵌入核酸雙鏈的配對鹼基之間,在紫外線激發下,發出桔紅色熒光.EB-DNA復合物中的EB發出的熒光,比游離的凝膠中的EB發出的熒光強度大10倍,因此無需洗凈背景即可清楚觀察核酸帶型.若EB背景太深,可將凝膠 浸泡於1mmol/LMgSO4中1h或10mmol/L MgCl2中5min,使非結合的EB褪色,這 樣可檢查到10ng的DNA樣品,EB也可用於檢測單鏈DNA或RNA,但其對單鏈核酸的親和力相對較小,熒光產率也相對較低.在凝膠或電泳緩沖液中加入終濃度為0.5μg/ml的EB,染色可在電泳過程中進行,能隨時觀察核酸的遷移情況.但EB帶正電荷,嵌入鹼基後增加了 核酸分子的剛性,使遷移率減慢,故不宜用於測定核酸分子量的大小,這時應在電泳後將凝膠浸入0.5μg/ml的EB水溶液中10min進行染色.EB見光 易分解,應於4℃避光保存,2、吖啶橙(acridine orange,AO):吖啶橙可嵌入雙鏈核酸鹼基對之間,在254nm紫外線激發下發出530nm的綠色熒光;還通過靜電與單鏈核酸的磷酸基結合,在254nm紫外線激發 下產生640nm的紅色熒光.因此可區分單鏈和雙鏈核酸,靈敏度分別為0.1μg和0.05μg.但吖啶橙的染色操作要求嚴格,應在 22℃,0.01mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.0)中避光浸泡30min,然後在搪瓷盤中用該緩沖劑4℃脫色過夜或22℃脫色1~2小時.3、銀(Ag+)試劑:Ag+與核酸形成穩定復合物,然後用甲醛使Ag+還原成銀顆粒.AgNO3等試劑可使聚丙烯醯胺凝膠上的單鏈,雙鏈DNA及 RNA都染成黑褐色.銀染法的靈敏度比EB染色高200倍左右,比亞甲藍染色高100~1000倍,在小於0.5mm厚的凝膠中,能檢測出0.5ng的 RNA,其缺點是專一性不強,能與蛋白質,去污劑反應也產生褐色,而且對DNA的染色定量不準確.銀與DNA穩定結合,對DNA有破壞作用,不適於DNA 片段回收的制備.4、亞甲藍(methylene blue)可將RNA染成藍色,但靈敏度不高,而且操作時間長.膠浸泡於0.02%的亞甲藍,10mmol/L Tris-Ac(pH8.3),4℃放置1~2h,用凈水洗5~8h(反復換水),帶型肉眼可見,最低檢測量為 250ng.
㈡ 醫學生,就業選擇,丁香園和外企,哪個更好
醫學生,沒有背景,很難進公立醫院。最好是先進醫院幾年,等考了資格證,再去外企。
㈢ 醫患關系的本質
醫患關系的本質是「利益共同體」。因為「醫」和「患」不僅有著「戰勝病魔、早日康復」的共同目標,而且戰勝病魔既要靠醫生精湛的醫術,又要靠患者戰勝疾病的信心和積極配合。對抗疾病是醫患雙方的共同責任,只有醫患雙方共同配合,積極治療,才能求得比較好的治療效果。醫患雙方在抵禦和治療疾病的過程中都處於關鍵位置,患者康復的願望要通過醫方去實現,醫方也在診療疾病的過程中加深對醫學科學的理解和認識,提升診療技能。在疾病面前,醫患雙方是同盟軍和統一戰線,醫患雙方要相互鼓勵,共同戰勝疾病。
維護醫患這對利益共同體的良好關系,需要醫患雙方的共同努力。一則有趣的民間傳說可作為注腳。唐朝葯王孫思邈外出采葯,遇一隻母虎張口攔路,隨從以為虎欲噬人而逃,孫思邈卻看出虎有難言之疾。原來這母虎被一長骨卡住了喉嚨,是來攔路求醫。孫思邈為其將異物取出,虎欣然離去。數日後孫思邈在返程中途經此地,那虎偕虎崽恭候路旁向他致意。這個故事起碼說明了兩個道理:第一,即使是吃人的猛虎患病,醫生也應本著仁義之心為它治療,何況生了病的人呢;第二,即使是吃人的猛虎對於為它解除病痛的醫生也懷有感恩之心,有禮貌地回應。從某種意義上說,相互尊重、相互配合、相互依存正是醫患關系的最基本特點。
㈣ 「丁香園·丁香醫生」霸佔平面背景影響使用如何清除
影響的話,只要清除就行了,先清除。後台是有運行的。
㈤ 小米手機如何清除「丁香園·丁香醫生」
如果想清除的話,直接在應用卸載裡面卸載就行了,你也可以長按這個應用,然後拖到卸載那個按鈕里就可以卸載了。
㈥ 杭州丁香園外商獨資是歐美嗎
是的。
丁香園 外文名稱 DXY 總部地點 杭州 成立時間 2000年7月23日 經營范圍 醫學 互聯網 公司性質 外資(非歐美) 創始人 李天天目錄 1網站歷史 2丁香園...
㈦ 細胞背景雜質多,到底是細胞碎片還是污染
黑色雜質?描述不清楚,如果顯微鏡下靜止不動,可能是棉花火燒後的灰燼,問題不大,如果游動的話,並且黑點數量增長,一定是污染了,有條件的話,最好舍棄細胞,用抗生素挽救的話,對細胞也有很大的損傷.
貼一些東西你看看,如果還是不明白,照張照片發到丁香園bbs問問~
常見的污染如下:
1、細菌:細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀,根據感染細菌的不同,可有不同的外形,培養液一般會渾濁變黃,對細胞生長影響明顯.
仔細檢查一下器皿的滅菌情況,是否在高壓滅菌時放氣時間足夠,壓力足夠!尤其是和儲存培養液接觸的移液管等物品,連續兩次污染的話有可能造成儲存液污染,一定要注意!下次使用前檢查一下培養液是否存在渾濁的現象!
可在培養液中加相應的抗生素處理
2、黴菌:培養液是清亮的,倒置顯微鏡下無雜質,37度孵箱培養2-3天,仍清亮,但出現絮狀雜質,鏡下可見呈細絲狀的團狀漂浮物,可看到明顯的菌絲,細胞仍可生長,但時間長之後,細胞的活力狀態變差,
用硫酸銅溶液擦拭CO2孵箱內,再把水盤里也加上飽和量的硫酸銅.或者在培養箱的托盤加入飽和的消毒磷酸氫二鈉高鹽液體,可以防止黴菌污染.
3、支原體:黑色的,好象多為多形,培養液一般培養液一般會渾濁,原體感染,國內血清很多都沒有做支原體陰性檢測,而支原體是牛血清中最常見的微生物之一.而且它不能用過濾的辦法除去.支原體感染細胞以後,細胞病變不很明顯,只是慢慢死去.
用泰樂菌素,獸用支原體病的葯,但可用於細胞培養,無任何不良反應.Sigma公司的使用時用50ug/ml Tylosin培養液培養6天或連續傳兩代即可清除支原體污染.如果作為常用的抗生素的話,建議用8ug/ml的濃度.
4、黑蛟蟲:可以穿透濾膜,也可以通過空氣傳播,低倍下為黑色點狀,高倍下可看見黑色的小蟲游來游去,培養液也是不渾的,一般不會太影響,細胞還是可以用的.常常是細胞生長狀態良好,且觀測到的運動物無明顯增多,且培養液顏色、透明度無明顯變化,可在同一批號的血清養的細胞中發現類似現象.對細胞生長狀態不會有明顯影響,在細胞增殖旺盛之後會自然消失,除更換血清外無須特殊處理.建議如果細胞有可能是此種污染的話,可以增加細胞的種板密度,以提高細胞的生存率.
5、真菌:一般培養液清亮,不變色,鏡下有絲狀物,有些真菌開始很像死細胞碎片,只是它很多很多的小塊很清楚,象珊瑚狀,不象細胞碎片分不清,慢慢的會長出很細的黑色絲狀物.真菌生長的比較慢,不象細菌那麼容易被發現,但是一旦發現有它的存在細胞就被污染了,也很難救活了.
6、原蟲:培養液可輕微渾濁,顯微鏡下那些細小的點狀物數量非常多,輕微活動,細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢,而且細胞狀態不好,邊緣不清楚,細胞不透亮.他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養.這種共生是非常普遍的,但他們的數量小,細胞站優勢所以不會影響到細胞的正常生長,只有當他們到達一定的數量時就會影響到細胞的生長,最終形成惡性循環.
污染的可能原因:可能原因很多比如配液消毒問題、操作問題、環境問題等等
關於培養基的無菌狀況,取培養基至培養瓶中(不加細胞),37度試培養一段時間後觀察.如果沒有細菌生長 就是操作的問題.
也可以在培養基中事先加入雙抗(硫酸鏈黴素和氨苄青黴素).但雙抗有時會影響細胞的狀態,所以在做轉染、檢測細胞某項指標前一定要撤去雙抗,以避免影響實驗結果.
㈧ 如果合夥人離開了,怎麼辦
創業本身就不易, 中途有合夥人要退出這事發生咋辦?很多人說,不可能,都是好兄弟,怎麼可能走呢!
說個很殘酷的事實,一個公司從小到大,合夥人離開是個大概率事件,翻遍幾個國家上市公司的團隊名單,幾乎所有的公司都經歷過合夥人離開的事情,或遲或早。
所以不要諱疾忌醫,應該正確面對這個事情。
最近娛樂圈的王寶強離婚事件,科技圈的馮大輝離職事件,刷遍朋友圈,前面的事不太懂,後面的關注多一些,根據高少星發的公號文章說,就是fenng在丁香園做了六年CTO,公司高管還進了董事會,最近離職了,有一些股份公司想回購,但是價格沒談攏,加上一些溝通和誤解,導致各種撕逼事件,因為文章刪了具體細節也不確定,只是抽象出一個問題,就是一直以來合夥人退出然後翻臉的事情時有發生,而且有可能對各方對公司都會造成非常大的影響,輕則品牌受損,重則業務一蹶不振。
提前准備:合夥協議
那合夥人退出咋辦呢?
這個得分提前准備和事後解決來討論
合夥人退出既然是個大概率事件, 在合夥之前,大家就應該先把協議先寫明白。
下面列了合夥協議的標配條款(主要參考: 鄭明龍律師的文章《干貨:創業團隊的合夥協議怎麼簽?》)
1.合作背景
合夥背景很容易被忽略,但這恰恰是最基礎的部分。闡述合作背景,是對合夥人之間據以合作的資源整合分析,是合夥人之間各自的角色定位和對項目的貢獻的梳理過程。
2.創業項目概述
創業項目是合夥事業的載體,開工之前,總得把要做什麼事情,做成什麼什麼樣搞明白,包括項目類型、經營范圍、領域、定位、運營模式、項目推進計劃、發展願景等。
3.出資
出資方式。法律規定的出資方式包括資金,土地、廠房等不動產,汽車等各種動產,專利、商標和著作權知識產權權益。創業實踐中,有些人是以技術、特定勞務或特定資源出資。創業實踐中得通過條款進行技術處理,進行合法化。
出資期限。出資期限包括資金到位,動產和不動產權利轉移,在創業團隊中,常見的轉移是知識產權權益轉移。出資方式及到位期限,得明確約定,確保合夥人的合作資源同步到位,保證創業項目的順利推進。
4.股權比例
在做股權結構時,都必須要考慮到股權激勵池、未來融資及引進新合夥人的股權代持。所以,在股權比例條款中,不能做常規約定,對於有代持情況的,應予以特別明確。
5.分工
在合夥人之間決定共同創業的那一刻,應該都對彼此分工有明確的認識和界定,(投黑馬www.touheima.com專注於文創領域的眾籌平台)但還是要通過書面的方式固定下來,誰是CEO、CTO、COO,要確定下來。明確分工的重要性還在於直接關系合夥人在項目的職責。
6.盈虧承擔
這是很重要的條款,其意義不言而喻。盈虧還是得說清楚,包括盈利怎麼分享,虧損怎麼承擔,其中的原則、規則和流程,應先小人後君子。
7.薪資
對於需要拿薪資的合夥人,還是要做具體約定。
8.財務
創業團隊的財務一般都是很不規范,沒有專職或兼職會計人員,但還是要規范資金保管、支出、記賬和監督。
9.決策和表決
合夥人依法享有法定的股東權利,這點是毋庸置疑。但創業的不確定性決定了其決策和表決權,必須不同,必須引入分歧表決規則。創業團隊需要核心,在創業項目及團隊重大事項表決方面,應當賦予CEO及其重要甚至一票通過和否決權。
10.股權成熟
設定相關的股權成熟機制。
11.股權稀釋
創業項目在融資時,肯定要稀釋股份,一般而言,創始人的股權都是按股權比例平等稀釋,但也有不作平等稀釋的情況,也有股份代持的特殊情況。因此,對於股權稀釋,應根據不同情況,作具體安排。
12.創業項目保護
一般的合夥人協議,容易忽略對創業項目的保護問題。
創業團隊在創業過程中,很容易因為各種分歧,而導致合夥人分崩離析,部分合夥人退出,帶走創業積累的技術、知識、經驗和模式,另起爐灶。
為防止這種情況出現,我一般要求創業團隊在合夥協議中,必須有加入保密、競業限制、同業禁止、全身心投入和商業模式保護條款。商業模式保護條款比較少見,在美國,商業模式是受法律保護的,但並沒有包括商業模式。但法律未列入保護范圍,不意味著不可約定。即對創業項目的商業模式進行明確約定,誰要是另起爐灶或泄密,就得承擔違約或賠償責任。
13股權轉讓、退夥和吸收入伙
為保證創業項目的穩定性,一般禁止合夥人對外轉讓股份。
創業過程中,部分合夥人因各種原因退出,及因項目需要引進新的合夥人,都是很正常,但合夥人的退出及入伙必須要講好規則,否則,對項目的影響是非常大,甚至是致命的。這里,就必須對退夥的准許事由、退夥流程,吸收入伙條件、表決和流程,都必須進行詳盡的約定。
14清算
清算條款也很重要,創業項目固然想要成功,但也得考慮可能存在的失敗的情況,對創業失敗後合夥事業、財產的清算流程和規則進行約定,特別是對於創業過程中取得的知識產權成果的清算,尤為重要。
事後解決:股份回購/股權落實
如果以上這些事前沒列明白,那這個就要費點心思了
首先,如果公司還不太大,離開的合夥人要是對股權不太在意, 留給還在奮斗的兄弟們那最好了,還在的兄弟們道一聲謝謝。
如果公司發展的有一定規模了, 股權相對值錢了, 這個可能就需要大家坐下來商量一下了, 一般來說也有兩種解決方案,公司或者其他股東按一個價格回購股份, 另外一個解決方案就是股權落實(股權如何落實到個人)。
Fenng與丁香園的矛盾主要因為限制性股票回購和參照估值的意見不統一,
知乎楠爺也寫了篇文章《閑話限制性股票回購:為什麼按照上一輪估值回購不靠譜》
為什麼說公司一般不會按照上一輪估值回購,其實原因很簡單,在公司沒有IPO或者並購之前,所有的估值都是不被市場廣泛承認的,我舉個例子吧:
小A在2012年獲得行權資格,按照當時公司估值1000萬美元拿到了公司限制性股票,2014年,公司C輪估值到了4億美元,2016年行業不景氣,公司發生了巨大的困難,小A也不太順心,想離職,此時公司也想對外融資,但是估值已經跌到了1億美元,那我們試想一下,小A離職的時候,公司會以四億美元估值回購他的股票么?這顯然不可能。這是個制度性問題,如果我們只看到公司當前估值相當於上一輪漲了三倍就要答應這個回購條件,那麼未來公司估值下跌,公司股東和在持股的員工損失只會更大。我們很多人看問題,只看到自己的利益訴求,看不到公司在統籌這個事情上的難度和不可操作性。
再說上市公司期權和限制性股票。去年股災之後,很多上市公司推出了員工激勵計劃和期權計劃,但正式授予的時候,股價比當時定的期權價還要低,使得很多公司的激勵計劃直接流產。員工都不傻,不會高於市價參加激勵計劃,那麼公司為什麼還要以上一輪估值回購呢?上市公司的限制性股票在限制期內回購,都是原始價格回購,直接注銷的,從未聽過按照上市公司某個時間的市值回購員工股票的,這不合理,也無法操作。
所以,討論員工的股權回購,用上一輪估值是不合理的,也沒法操作,如果非要說有什麼建議,我的建議就是,在足夠好的工資+業績獎金機制的基礎上談限制性股票,基本不要考慮期權。目前看,行權成本,行權周期,限制條件和納稅,對於一個普通人來說,毫無意義,如果以顯著低於行業標準的工資+獎金,只是為了期權,毫無意義。
合夥人離開一些不能做的事兒
在合夥人離開的時候,當事人雙方有些事情盡量不要去做。
不要把一些還沒談好的事情公開
不要去公開吐槽或者抱怨
不要去糾纏小利益
不要去翻舊賬
不要去講一些公司戰略層面的機密信息
本著「好聚好散」的原則,以上對於事情的處理並沒有什麼幫助,且可能激化矛盾,對公司和兩方本人帶來不利的輿論影響。
而且在一些關鍵時間點, 大家都處於一個很敏感的狀態, 很多無意的動作可能都會被曲解或者誤解,所以最好還是盡量少做動作。
小結
親兄弟,明算賬, 才是真兄弟
合夥創業的初衷肯定是志同道合、互相認可,但是創業道路避免不了發生態度不合、合夥人離開的情況,各位創業者還需理性看待,做好事前的准備,想好事後的預案都是有必要的,失去了一個合夥人還能再招,如果因為大家利益矛盾,互相傷害, 甚至公開撕逼那就得不償失了。
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㈨ 丁香園董事長稱男人最適合穿裙子,為何這么說
因為男人的個子一般都比較高挑,而且男人的胯都比較大,所以穿裙子看起來也很性感。
㈩ ob/ob小鼠是什麼
ob/ob小鼠是指肥胖症鼠,肥胖小鼠體重可達60克,這種小鼠無生育力,表現為單純胖專而不伴有糠尿屬病。純合體大約在四周齡時即可識別出,此時其增重加速,很快可達到正常同窩鼠體重的3倍。
中等程度的攝食過度可使其幾乎不太活動,但在幼年時其血糖和免疫活性胰島素並不明顯增加,5~6月齡以後,肥胖趨向穩定,胰島素和葡萄糖水平上升,這些小鼠不受外來胰島素的影響,但節制食物可增加對胰島素的敏感性以及延長其壽命。
(10)丁香園背景擴展閱讀
中國相關鼠的實驗
由於對人類糖尿病發生慢性血管並發症的器官組織病理學的前瞻性觀察較困難,往往是通過建立動物模型進行觀察。
類似於人類1型糖尿病的動物模型主要為鏈脲菌素所致的大鼠和小鼠糖尿病模型和BB鼠、NOD鼠自發型糖尿病動物模型。
類似人類2型糖尿病動物模型主要為ZDF(fa/fa)(Zucker diabetic fatty)鼠和自發性糖尿病中國地鼠(Chinese Hamster)模型。對這些動物的胰島功能已做了許多研究〔1~4〕。